Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-BRSK1 per WB, IHC-P, ELISA - Q8TDC3

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di BRSK1

• BRSK1 (noto anche come SAD-B, hSAD1) è una serina/treonina-proteina chinasi appartenente alla famiglia AMPK, codificata dal gene BRSK1 sul cromosoma 19.
• Svolge un ruolo chiave nella polarizzazione neuronale fosforilando proteine associate ai microtubuli come MAPT/TAU in Thr-529 e Ser-579, e fosforilando WEE1 in Ser-642 per downregolarne l'attività.
• BRSK1 regola la duplicazione del centrosoma fosforilando la gamma-tubulina (TUBG1 e TUBG2) in Ser-131, promuovendone la traslocazione al centrosoma.
• La chinasi è attivata dalla fosforilazione mediata da STK11/LKB1 e successivamente fosforila substrati tra cui CDC25B, CDC25C e RIMS1, collegandola alla regolazione del ciclo cellulare e delle vescicole sinaptiche.
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nel centrosoma e nelle vescicole sinaptiche, in linea con i suoi ruoli nel ciclo cellulare, nella risposta al danno al DNA e nel rilascio di neurotrasmettitori.
• BRSK1 è coinvolto nel checkpoint del danno al DNA indotto da UV inibendo l'attività di CDK1 attraverso la fosforilazione e l'attivazione di WEE1 e l'inibizione di CDC25B e CDC25C.
• È ampiamente espresso, con i livelli più alti nel cervello e nei testicoli, e i livelli proteici rimangono costanti durante tutto il ciclo cellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blotting (WB), la banda prevista è a ~85 kDa; si consiglia l'uso di un gel riducente e di appropriati marcatori di peso molecolare.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), il segnale può essere influenzato dal metodo di recupero dell'antigene; testare sia tamponi a base di citrato che di EDTA potrebbe essere vantaggioso.
• Poiché l'anticorpo è policlonale, la consistenza da lotto a lotto dovrebbe essere verificata per saggi quantitativi critici.
• L'immunogeno corrisponde a una regione all'interno del dominio chinasi e del C-terminale; pertanto, l'anticorpo può riconoscere sia la forma a lunghezza intera che le varianti di splicing se l'epitopo è conservato.
• È indicata la reattività incrociata con topo e ratto; tuttavia, l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno dovrebbe essere verificata se si utilizzano campioni non umani.
• Per applicazioni ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di cattura specifico per BRSK1 può aumentare la sensibilità; considerare di testare formati ELISA diretti e sandwich.

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