Anticorpo policlonale anti-BTK per WB, IHC-P, ELISA - Q06187

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del BTK

• Il BTK (chinasi tirosinica di Bruton) è una chinasi tirosinica non recettoriale essenziale per lo sviluppo, la differenziazione e la segnalazione dei linfociti B. Fosforila PLCG2 in cooperazione con BLNK dopo l'attivazione del recettore degli antigeni delle cellule B (BCR), innescando la mobilizzazione del calcio a valle e l'attivazione della chinasi C delle proteine. Riferimenti correlati: PMID:11606584
• Agisce come piattaforma di segnalazione che collega percorsi diversi; coinvolto nella segnalazione dei recettori delle citochine e nei percorsi dei recettori Toll-like (TLR), svolgendo un ruolo critico nell'immunità innata e adattativa. Riferimenti correlati: PMID:16517732 PMID:17932028
• All'interno del percorso TLR, il BTK regola l'attivazione di TLR9 nelle cellule B spleniche e media la fosforilazione tirosinica di TIRAP, portando alla sua degradazione. Riferimenti correlati: PMID:16415872 PMID:16517732 PMID:17932028
• Induce l'attività di NF-kappa-B tramite la segnalazione TLR8/9, regolando la trascrizione di centinaia di geni; fosforila anche transitoriamente il fattore di trascrizione GTF2I, promuovendo la sua translocazione nucleare e la modulazione dell'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:19290921 PMID:9012831
• Contribuisce alla regolazione della trascrizione attraverso ARID3A e NFAT; richiesto per la formazione del complesso di legame al DNA funzionale di ARID3A, sebbene non sia stato dimostrato un legame diretto al DNA. Riferimenti correlati: PMID:16738337
• Esibisce un duplice ruolo nella regolazione dell'apoptosi e partecipa alla risposta agli interferoni di tipo I mediata da STING1 fosforilando DDX41. Riferimenti correlati: PMID:9751072 PMID:25704810
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, la membrana cellulare, il nucleo e i raft di membrana, riflettendo i suoi ruoli di segnalazione dinamici. Espresso prevalentemente nei linfociti B.
• Le caratteristiche della proteina includono i domini SH2, SH3 e PH, un motivo a dito di zinco e un dominio chinasi; le modificazioni post-traduzionali come la fosforilazione e l'acetilazione regolano la sua attività.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre i domini PH e TH N-terminali (aa 30-240), che mediano il targeting della membrana e le interazioni proteina-proteina. Ciò può consentire il riconoscimento sia delle forme fosforilate che non fosforilate del BTK.
• Per il Western blot, è prevista una banda a circa 76 kDa; convalidare l'espressione utilizzando linee cellulari di linfociti B (es. Ramos, Raji) e controlli di caricamento appropriati.
• In IHC-P, considerare il recupero dell'epitopo indotto dal calore e confermare il modello di colorazione nei tessenti ricchi di cellule B come la milza o il linfonodo; si raccomandano controlli di isotipo.
• Per ELISA, titolare l'anticorpo per determinare le concentrazioni ottimali di rivestimento e rilevamento; la reattività crociata con il BTK di mouse e ratto può facilitare studi multispecie.
• Si noti che il BTK è espresso a bassi livelli nelle cellule non B; si consiglia l'inclusione di controlli di campione appropriati per evitare falsi negativi.

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