Anticorpo Policlonale Anti-BUB1B per WB, IF/ICC, ELISA - O60566

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di BUB1B

• BUB1B (conosciuto anche come BUBR1, MAD3L, SSK1) è una serina/treonina protein-chinasi appartenente alla famiglia BUB1 e rappresenta un componente chiave del complesso di controllo mitotico (MCC).
• In quanto componente dell'MCC (insieme a CDC20, MAD2L1 e BUB3), BUB1B inibisce il complesso promoteore dell'anafase/ciclosoma (APC/C), ritardando la segregazione cromosomica finché tutti i cromosomi non sono correttamente attaccati al fuso mitotico. Monitora inoltre le attività del cinetocoro dipendenti da CENPE ed è necessario per la localizzazione di CENPE al cinetocoro. Riferimenti correlati: PMID:27509861 PMID:11702782 PMID:14706340 PMID:15020684 PMID:10477750 PMID:19503101
• BUB1B regola negativamente l'attività di PLK1 nelle cellule in interfase, sopprimendo quindi l'amplificazione dei centrosomi. Può anche funzionare come oncosoppressore. Riferimenti correlati: PMID:19503101
• La localizzazione subcellulare comprende citoplasma, nucleo, centromero/cinetocoro e centrosoma.
• È espresso a alti livelli nel timo e nella milza, e si trova preferibilmente nei tessuti con un alto indice mitotico.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione; la proteina fa parte delle vie di coniugazione dell'ubiquitina. Esistono più isoforme da splicing alternativo e le mutazioni sono associate a varianti patologiche.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 1‑260) di BUB1B umano; questo progetto è adatto per rilevare la proteina BUB1B totale nei campioni.
• Per il Western blotting, è prevista una banda vicino a 120 kDa; ottimizzare la percentuale di gel, le condizioni di trasferimento e il blocco per ridurre al minimo i segnali non specifici.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, utilizzare preparazioni di cellule in mitosi per osservare la localizzazione caratteristica al cinetocoro/centromero; si raccomanda la co-colorazione con marcatori del fuso o del cinetocoro.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per la quantificazione relativa, ma le condizioni di prova devono essere validate nel sistema di campionamento corrispondente.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati e confermare la reattività dell'anticorpo nel vostro contesto sperimentale specifico.

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