Anticorpo monoclonale di coniglio anti-BUB3 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O43684

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di BUB3

• BUB3 (proteina BUB3 del checkpoint mitotico) è una proteina di circa 37 kDa codificata dal gene BUB3, con molteplici isoforme prodotte mediante splicing alternativo.
• Svolge un duplice ruolo nel checkpoint di assemblaggio del fuso, sia nella segnalazione sia nel promuovere il corretto attacco cinetocoro-microtubulo (K-MT), garantendo la fedeltà della segregazione cromosomica.
• BUB3 forma un complesso con BUB1 per inibire il complesso promotore dell'anafase/ciclosoma (APC/C) mediante la fosforilazione del suo attivatore CDC20, ritardando così l'inizio dell'anafase quando il checkpoint è attivo.
• Il complesso BUB1/BUB3 fosforila inoltre MAD1L1, contribuendo ulteriormente all'arresto mitotico finché tutti i cromosomi non raggiungono il corretto attacco bipolare.
• BUB3 è essenziale per la localizzazione cinetocorica di BUB1 e regola la segregazione cromosomica durante la meiosi degli ovociti.
• A livello subcellulare, BUB3 si localizza nel nucleo e si concentra nei centromeri e nei cinetocori dei cromosomi durante la mitosi.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, ADP-ribosilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, riflettendo la sua regolazione dinamica durante il ciclo cellulare.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) di BUB3 umano; è probabile che l'anticorpo riconosca BUB3 a lunghezza intera e qualsiasi isoforma conservata all'estremità N-terminale.
• Per il Western blot, la banda prevista è a circa 37 kDa; a causa di potenziali modifiche post-traduzionali, possono essere osservate bande aggiuntive; verificare la specificità utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.
• Nelle applicazioni IHC-P e IF/ICC, ottimizzare il recupero antigenico e le condizioni di fissazione/permeabilizzazione per il tessuto o il tipo cellulare specifico; valutare l'uso di marcatori cinetocorici noti come co-colorazioni per confermare la localizzazione.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere la titolazione sia dei reagenti di cattura sia di quelli di rilevazione; non vengono forniti valori OD assoluti.

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