Anticorpo policlonale anti-C10orf2/elicasi Twinkle del mtDNA per WB, ELISA - Q96RR1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'elicasi Twinkle del mtDNA

• Elicasi mitocondriale essenziale coinvolta nella replicazione e nella riparazione del mtDNA. Promuove la separazione dei filamenti di DNA per formare forcelle di replicazione processive necessarie alla sintesi del filamento guida. Riferimenti correlati: PMID:12975372 PMID:15167897 PMID:17324440 PMID:18039713
• Partecipa alla riparazione del mtDNA, inclusa la dissociazione dei filamenti invasori da strutture D-loop immobili o mobili, indipendentemente dalla polarità del filamento singolo. Riferimenti correlati: PMID:27226550
• Forma un complesso replisoma con la DNA polimerasi gamma (POLG) e la proteina mitocondriale legante il DNA a singolo filamento (mtSSB). Svolge preferenzialmente substrati di DNA contenenti code a singolo filamento preesistenti in posizione 5' e 3' e strutture a flap 5'. Riferimenti correlati: PMID:12975372 PMID:15167897 PMID:18039713
• Oltre alla funzione di elicasi, presenta attività di appaiamento dei filamenti di DNA, scambio dei filamenti e migrazione delle ramificazioni. Riferimenti correlati: PMID:22383523 PMID:26887820 PMID:27226550
• Si localizza nella matrice mitocondriale, nei nucleoidi e nella membrana interna, in accordo con il suo ruolo nel mantenimento del mtDNA.
• L'espressione tissutale è più elevata nel muscolo scheletrico, nei testicoli e nel pancreas, con livelli inferiori nel cuore, nel cervello, nel fegato, nei reni e in altri tessuti. L'espressione è co-regolata con MRPL43.
• Lo splicing alternativo produce un'isoforma priva delle attività di svolgimento del DNA e di idrolisi dell'ATP, incapace inoltre di legare il DNA a singolo o doppio filamento. Riferimenti correlati: PMID:18039713
• È associata a molteplici disturbi mitocondriali, tra cui l'oftalmoplegia esterna progressiva (PEO) e la sindrome da deplezione del DNA mitocondriale, evidenziandone l'importanza clinica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 585–684, una regione probabilmente conservata nel topo, come indicato dalla reattività crociata. Per il Western blot, prevedere una banda intorno a 77 kDa; confermare il rilevamento utilizzando controlli positivi e negativi appropriati nel proprio sistema di campioni.
• Per le applicazioni ELISA, valutare l'impiego del peptide immunizzante come antigene di rivestimento o controllo di competizione per verificare la specificità dell'anticorpo.
• Essendo un reagente policlonale, la consistenza tra lotti può variare; è consigliabile qualificare ogni nuovo lotto nel proprio test prima dell'impiego su larga scala.
• Data la localizzazione intramitocondriale di Twinkle, assicurarsi di utilizzare protocolli efficienti di arricchimento o lisi mitocondriale durante la preparazione dei campioni.

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