Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-C3 per WB, IF/ICC, ELISA - P01024

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di C3

• Il complemento C3 è il componente centrale delle vie del complemento classica, alternativa, delle lectine e GZMK. è il precursore dell'opsonina C3b che si lega covalentemente alle superfici dei patogeni, marcandoli per la fagocitosi, e forma il complesso C5 convertasi che attiva il complemento C5. Riferimenti correlati: PMID:28264884, PMID:31507604, PMID:3653927, PMID:6903192, PMID:12878586, PMID:18204047, PMID:2387864, PMID:624565, PMID:6554279
• L'anafilatossina C3a, generata dalla scissione della C3 convertasi, si lega al recettore C3AR1, inducendo la degranulazione dei mastociti e dei basofili, la chemiotassi dei macrofagi e dei neutrofili e il rilascio di citochine proinfiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:6968751, PMID:37169960, PMID:37852260, PMID:8702752, PMID:23383423, PMID:342601, PMID:5778786
• C3 funziona come ormone adipogeno, stimolando la sintesi dei trigliceridi e il trasporto del glucosio negli adipociti attraverso il recettore C5AR2 e le vie di segnalazione a valle di PLC, MAPK e AKT. Riferimenti correlati: PMID:10432298, PMID:15833747, PMID:16333141, PMID:11773063, PMID:12540846, PMID:19615750
• Agisce come chemiotattico per i neutrofili nell'infiammazione cronica.
• C3 è secreta e si trova anche sulla superficie cellulare; il suo legame tioestere reattivo permette l'attacco covalente alle superfici bersaglio.
• Il plasma è il sito principale di C3, ma viene anche prodotto e rilasciato dagli adipociti durante i periodi di digiuno e postprandiali.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di legami disolfuro, formazione del legame tioestere e fosforilazione, critiche per la sua stabilità e funzione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al frammento C3c (amminoacidi 1364-1663); l'anticorpo può riconoscere la C3 a lunghezza intera e i prodotti di scissione che contengono questa regione, come C3b e C3c.
• Per Western blot (WB), ci si aspetta una banda intorno a 187 kDa in condizioni riducenti; possono comparire ulteriori bande a peso molecolare inferiore a causa della lavorazione fisiologica di C3.
• Per immunofluorescenza/ICC, è necessario ottimizzare protocolli adeguati di fissazione e permeabilizzazione; si consiglia di utilizzare un controllo positivo come cellule trattate con siero o sezioni di tessuto per valutare la colorazione specifica.
• Nelle applicazioni ELISA, l'abbinamento con altri anticorpi anti-C3 o marcatori del complemento può aumentare la sensibilità; includere controlli negativi adeguati per confermare la specificità.
• Validare l'anticorpo nei sistemi di campioni rilevanti (es. umano, topo, ratto) e valutare le sue prestazioni nei saggi di attivazione del complemento.

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