Anticorpo policlonale di coniglio anti-C4c per WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P0C0L5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del Complemento C4-B

• Il Complemento C4-B è un componente centrale delle vie del complemento classica e delle lectine: funziona come precursore che viene attivato proteoliticamente per promuovere l'opsonizzazione, l'eliminazione dei patogeni e la segnalazione immunitaria adattativa.
• Dopo la scissione da parte di C1S, MASP2 o GZMK, il frammento C4b si lega covalentemente alle superfici dei patogeni e recluta C2 per formare le C3 e C5 convertasi. L'isotipo C4b-B catalizza preferenzialmente la transacilazione del suo gruppo carbonile tioestere per formare legami estere con antigeni carboidrati, mentre l'isotipo C4b-A forma legami ammidici con antigeni proteici. Riferimenti correlati: PMID:8538770
• Durante l'attivazione viene rilasciato il frammento simile all'anafilatossina C4a; il suo ruolo nell'infiammazione locale è controverso, poiché i primi risultati potrebbero essere stati distorti dalla contaminazione di C3a e C5a.
• Il Complemento C4-B è espresso principalmente nel fegato, con livelli moderati nella corteccia surrenale, nel midollo surrenale, nella tiroide e nel rene, e livelli più bassi nel cuore, nell'ovaio, nell'intestino tenue, nel timo, nel pancreas e nella milza, suggerendo funzioni immunitarie sia sistemiche che locali.
• Subcellolarmente, C4-B è secretato e può essere trovato anche sulle superfici cellulari, nelle sinapsi e nelle proiezioni neuronali (assoni e dendriti), indicando un ruolo potenziale nella potatura sinaptica e nella neuroinfiammazione.
• La proteina subisce estese modifiche post-traduzionali tra cui glicosilazione, solfatazione e fosforilazione, e contiene un legame tioestere critico essenziale per l'attacco covalente alle superfici bersaglio.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde al frammento C4c (residui 1337–1446); si prevede che l'anticorpo riconosca sia la C4 full-length che il frammento C4c tagliato. Convalidare la specificità nel vostro sistema di campioni.
• Per il western blot, il peso molecolare previsto della C4 full-length è ~192 kDa; in condizioni riducenti possono essere osservate più bande corrispondenti alle catene alfa, beta e gamma. Si consiglia di ottimizzare le condizioni di caricamento proteico e di rilevazione.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza (IF/ICC, IF-P), i protocolli di permeabilizzazione e fissazione devono essere adattati per rilevare la C4 secreta e associata alla membrana.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto consente l'utilizzo in modelli roditori; confermare la reattività nel tessuto o nel tipo cellulare di vostro interesse.

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