Anticorpo policlonale di coniglio anti-CACNG1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q06432

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CACNG1

• Il gene CACNG1 codifica la subunità gamma-1 del canale del calcio voltaggio-dipendente, un componente regolatorio del complesso del canale del calcio di tipo L nel muscolo scheletrico.
• In quanto subunità del canale del calcio di tipo L sensibile alle diidropiridine, CACNG1 modula la cinetica di inattivazione del canale, determinando l'ampiezza e la durata delle correnti di calcio.
• La proteina è espressa specificamente nel sarcolemma (membrana cellulare) delle fibre del muscolo scheletrico, in accordo con il suo ruolo nell'accoppiamento eccitazione-contrazione.
• CACNG1 è una glicoproteina transmembrana multipasso con ponti disolfuro, caratteristica delle subunità accessorie dei canali ionici.
• Le principali caratteristiche strutturali includono quattro eliche transmembrana, estremità N- e C-terminali intracellulari e un'ansa extracellulare contenente siti di glicosilazione.
• La famiglia delle subunità gamma (CACNG1-8) condivide una topologia comune, ma presenta un'espressione tessuto-specifica; CACNG1 è limitata esclusivamente al muscolo scheletrico.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è diretto contro la regione extracellulare N-terminale (aa 30-110), il che può consentire il rilevamento della proteina matura nella sua conformazione nativa o in condizioni denaturanti.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare un gel a bassa percentuale per risolvere la banda da 25 kDa; si raccomanda di riscaldare i campioni in un tampone riducente per rompere i ponti disolfuro.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica, può essere necessaria la permeabilizzazione per consentire l'accesso all'epitopo intracellulare; validare la colorazione utilizzando un controllo positivo appropriato, come tessuto muscolare scheletrico o miotubi.
• Data la natura policlonale, l'anticorpo può mostrare un'ampia reattività; confermare la specificità eseguendo un controllo con peptide bloccante o utilizzando campioni knockout.
• Ottimizzare empiricamente le diluizioni di lavoro per ciascuna applicazione e tipologia di campione (umano, topo, ratto) al fine di ottenere un rapporto segnale/rumore ottimale.

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