Anticorpo policlonale Anti-CAD per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27708

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CAD

• CAD è una proteina multifunzionale che svolge le prime tre attività enzimatiche della via di biosintesi de novo delle pirimidine: carbamoilfosfato sintetasi (CPSasi), aspartato transcarbamilasi (ATCasi) e diidroorotasi (DHOasi).
• La funzione CPSasi si svolge in due fasi: un dominio amidotransferasi dipendente da glutammina (GATasi) genera ammoniaca, che viene poi utilizzata dal dominio carbamoilfosfato sintetasi dipendente da ammonio per produrre carbamoilfosfato da ATP e idrogenocarbonato.
• L'ATCasi catalizza la formazione di carbamoil-L-aspartato da L-aspartato e carbamoilfosfato.
• La DHOasi catalizza la ciclizzazione del carbamoilaspartato in diidroorotato, completando le fasi iniziali della sintesi di UMP.
• CAD si localizza sia nel citoplasma che nel nucleo.
• È soggetto ad acetilazione e fosforilazione e funziona come enzima allosterico dipendente da zinco e metalli.
• Le mutazioni nel gene CAD sono associate al disordine congenito della glicosilazione di tipo 1Z (CDG1Z) e all'encefalopatia epilettica e dello sviluppo 50 (DEE50/EIEE50).
• I nomi alternativi di CAD includono Carbamoilfosfato sintetasi 2-aspartato transcarbamilasi-diidroorotasi.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione C-terminale (aa 1650-1900) di CAD umano; tieni conto di questo quando interpreti i dati in studi di troncamento o isoforme.
• Per il western blotting, attendi una banda a circa 243 kDa; usa una percentuale di gel e condizioni di trasferimento appropriate per proteine ad alto peso molecolare.
• In IHC-P e IF/ICC si possono osservare sia colorazioni citoplasmatiche che nucleari; includi controlli appropriati e ottimizza la fissazione/permeabilizzazione.
• Valida l'anticorpo nel tuo tipo di campione e applicazione specifica eseguendo una serie di diluizioni, poiché le concentrazioni di lavoro ottimali possono variare.
• La reattività crociata con topo e ratto è riportata; conferma le prestazioni in queste specie se fanno parte del tuo sistema sperimentale.

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