Anticorpo monoclonale anti-Calnexina per WB, ELISA - P27824

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Calnexina

• La Calnexina è una proteina legante il calcio di 67,6 kDa localizzata principalmente nel reticolo endoplasmatico (RE), nota anche come IP90, p90 e proteina p88 legante l'antigene di classe I del complesso maggiore di istocompatibilità.
• Funge da chaperone che interagisce specificamente con le glicoproteine monoglucosilate neo-sintetizzate, favorendone il corretto ripiegamento e assemblaggio all'interno del RE.
• La Calnexina svolge un ruolo fondamentale nel sistema di controllo di qualità del RE trattenendo le subunità proteiche ripiegate in modo errato o non assemblate, impedendone così l'esportazione prematura verso l'apparato di Golgi.
• Può contribuire alla maturazione dei timociti associandosi ai complessi parziali del recettore dell'antigene T, agendo potenzialmente come complesso di segnalazione che regola questo processo.
• Ruoli aggiuntivi includono la partecipazione all'endocitosi mediata da recettore alla sinapsi, collegando la funzione del RE alla comunicazione neuronale.
• La localizzazione subcellulare si estende alla membrana mitocondriale e alla membrana dei melanosomi, indicando funzioni cellulari più ampie oltre al RE.
• Estese modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione, palmitoilazione e formazione di legami disolfuro, regolano la sua attività e le sue interazioni.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli aminoacidi 493-592 vicino all'estremità C-terminale della calnexina umana; si consiglia di convalidare l'accessibilità dell'epitopo nelle applicazioni bersaglio.
• Per Western blot, utilizzare condizioni riducenti con carichi proteici appropriati; il peso molecolare previsto è di ~68 kDa e si possono osservare bande aggiuntive dovute a modifiche post-traduzionali o isoforme.
• In ELISA, l'antigene peptidico può servire come controllo positivo; verificare linearità e sensibilità utilizzando concentrazioni note di calnexina ricombinante o lisati cellulari.
• Poiché questo anticorpo è convalidato per la reattività umana, convalidarne le prestazioni in linee cellulari umane rilevanti (es. HeLa, HEK293) o campioni di tessuto prima di studi su larga scala.
• Includere controlli negativi appropriati (es. lisati da knockout o blocco peptidico) per confermare la specificità nel vostro sistema sperimentale.

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