Anticorpo policlonale anti-Calpain 1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07384

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della calpaina-1

• La calpaina-1, codificata dal gene CAPN1, è nota anche come proteinasi neutra 1 attivata dal calcio (CANP 1), mu-calpaina o muCANP, e funge da subunità catalitica della proteasi calpaina micromolare.
• Funziona come tiol-proteasi non lisosomiale regolata dal calcio, mediando la proteolisi limitata di substrati coinvolti nel rimodellamento del citoscheletro e nella trasduzione del segnale. Riferimenti correlati: PMID:19617626, PMID:21531719, PMID:2400579
• La calpaina-1 scinde specificamente CTBP1 in corrispondenza di asparagina-375, glicina-387 e istidina-409, e scinde e attiva anche la caspasi-7 (CASP7). Riferimenti correlati: PMID:23707407, PMID:19617626
• A livello subcellulare, la calpaina-1 si localizza nel citoplasma e nella membrana cellulare.
• È espressa ubiquitariamente nei tessuti umani.
• Le caratteristiche principali includono la scissione autocatalitica, i domini EF-hand di legame al calcio e la suscettibilità all'acetilazione e alla fosforilazione; le mutazioni di CAPN1 associate a malattie sono correlate alla paraplegia spastica ereditaria.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, si prevede una banda di circa 82 kDa; si consiglia di utilizzare controlli positivi e negativi appropriati e di validare il prodotto nel proprio sistema campione.
• Per IHC-P, i metodi di recupero antigenico, come il recupero degli epitopi indotto dal calore, possono migliorare il rilevamento; ottimizzare le condizioni di colorazione per il tipo di tessuto specifico e la diluizione dell'anticorpo.
• Per IF/ICC, è necessaria la permeabilizzazione per rilevare la calpaina-1 intracellulare; le condizioni di fissazione devono essere ottimizzate con attenzione.
• In base all'omologia di sequenza, si prevede che l'anticorpo riconosca la calpaina-1 umana, murina e di ratto; la reattività crociata deve essere validata sperimentalmente nel sistema modello pertinente.
• Le prestazioni dell'ELISA possono essere ottimizzate mediante una titolazione a scacchiera dell'anticorpo e dell'antigene; utilizzare fasi appropriate di blocco e lavaggio.

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