Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Calpaina 1 per WB, IF/ICC, ELISA - P07384

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Calpaina 1

• La Calpaina 1, codificata da CAPN1, è la subunità catalitica della proteasi neutra attivata dal calcio calpaina-1, nota anche come mu-calpaina (muCANP).
• Funziona come una tiol-proteasi non lisosomiale regolata dal calcio, che catalizza la proteolisi limitata di substrati coinvolti nel rimodellamento del citoscheletro e nella trasduzione del segnale. Riferimenti correlati: PMID:19617626, PMID:21531719, PMID:2400579
• La Calpaina 1 scinde e attiva la caspasi-7 (CASP7), collegando così la sua attività proteolitica alle vie apoptotiche. Riferimenti correlati: PMID:19617626
• Scinde proteoliticamente il co-repressore trascrizionale CTBP1 in residui specifici (Asn-375, Gly-387, His-409), suggerendo il coinvolgimento della calpaina-1 nella regolazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:23707407
• La proteina è localizzata principalmente nel citoplasma e può associarsi alla membrana cellulare in seguito all'attivazione da parte del calcio.
• L'espressione di CAPN1 è ubiquitaria nei tessuti umani, sottolineandone il ruolo cellulare fondamentale.
• Le varianti associate a malattie in CAPN1 causano la paraplegia spastica ereditaria (SPG76), evidenziando l'importanza della proteina nel mantenimento neuronale.
• Le modificazioni post-traduzionali, tra cui il clivaggio autocatalitico, l'acetilazione, la fosforilazione e l'ubiquitinazione, regolano strettamente l'attività e la stabilità della calpaina 1.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 100-200 della Calpaina 1 umana; questa regione può essere conservata nel topo e nel ratto, il che potrebbe spiegare la reattività crociata osservata.
• Per il Western blot, valutare condizioni riducenti di SDS-PAGE per rilevare la subunità maggiore della Calpaina 1 di circa 82 kDa; validare utilizzando controlli positivi appropriati.
• Negli esperimenti di IF/ICC, può essere necessaria la permeabilizzazione per consentire l'accesso alla calpaina-1 intracellulare; ottimizzare la fissazione per preservare il riconoscimento dell'epitopo.
• Per le applicazioni ELISA, rivestire le piastre con il peptide immunogeno o con la proteina ricombinante e validare le condizioni di rilevamento nel sistema di campioni pertinente.

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