Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Calpaina 1 per WB, ELISA - P07384

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Calpaina 1

• La Calpaina-1 è una proteasi tiolica non lisosomiale regolata dal calcio che catalizza una proteolisi limitata di substrati coinvolti nel rimodellamento del citoscheletro e nella trasduzione del segnale.
  Riferimenti correlati:
  PMID:19617626 | PMID:21531719 | PMID:2400579
• L'enzima scinde proteoliticamente CTBP1 in Asn-375, Gly-387 e His-409, e attiva la caspasi-7 (CASP7) per regolare l'apoptosi.
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  PMID:23707407 | PMID:19617626
• La Calpaina-1 si localizza sia nel citoplasma che nella membrana cellulare, facilitando il suo ruolo negli eventi di segnalazione prossimali alla membrana.
• È espressa ubiquitariamente nei tessuti umani, sottolineando le sue funzioni di mantenimento e regolazione.
• Come membro della famiglia delle peptidasi C2, la calpaina-1 contiene un sito attivo cisteinico e multipli domini di legame del calcio EF-hand.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, scissione autocatalitica e fosforilazione, che ne modulano l'attività.
• Le mutazioni nel gene CAPN1 sono associate alla paraplegia spastica ereditaria autosomica recessiva (SPG76), evidenziandone l'importanza per la salute neuronale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il western blotting (WB), considerare l'uso dell'immunogeno ricombinante (amminoacidi 20–330) come controllo positivo per confermare la specificità della banda.
• L'attività della Calpaina-1 è strettamente dipendente dal calcio; includere Ca²⁺ sufficiente nei tamponi di lisi e saggio per mantenere la proteasi in una conformazione attiva.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo confrontando i segnali in lisati cellulari wild-type versus lisati di cellule con knockout o knockdown di CAPN1.
• Nelle applicazioni ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento utilizzando la proteina calpaina-1 purificata; l'anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevamento in un formato sandwich.

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