Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Calpaina 2 per WB, ELISA - P17655

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della subunità catalitica della Calpaina-2

• La subunità catalitica della Calpaina-2 (nota anche come CANP2, mCANP, CANPL2, CANPml) è una tiol-proteasi non lisosomiale regolata dal calcio, codificata dal gene CAPN2.
• Essa catalizza la proteolisi limitata di substrati coinvolti nel rimodellamento del citoscheletro e nella trasduzione del segnale.
• La Calpaina-2 scinde proteoliticamente MYOC (miocilina) in corrispondenza di Arg-226 (PubMed:17650508). Riferimenti correlati: PMID:17650508
• In seguito alla stimolazione neuronale, scinde CPEB3, abolendo l'attività repressiva sulla traduzione di CPEB3 (per similarità).
• La proteina è localizzata nel citoplasma e può associarsi alla membrana cellulare.
• È espressa ubiquitariamente nei tessuti.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e scissione autocatalitica; la proteina contiene inoltre domini di legame del calcio e legami isopeptidici.
• La Calpaina-2 appartiene alla famiglia delle calpaine ed è anche denominata M-calpaina (calpaina millimolare) a causa del suo fabbisogno di calcio.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dalla regione C-terminale (aa 600-700) della calpaina-2 umana. Considerare la posizione di questo epitopo nella progettazione degli esperimenti di validazione.
• Per il Western blot, una banda intorno a 80 kDa corrisponde alla subunità catalitica a lunghezza intera. Validare nei lisati di campioni umani, murini o di ratto pertinenti.
• Nelle applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore e confermare il legame al peptide immunizzante o alla proteina ricombinante.
• Data l'attività calcio-dipendente della calpaina-2, considerare l'impatto della concentrazione di calcio sulla conformazione proteica in caso di rilevamento della proteina nativa.
• È stata riportata reattività crociata con topo e ratto; validare nel proprio sistema campione specifico.

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