Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CaMKI per WB ed ELISA - Q14012

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CaMKI/CaMKI-alfa

• La proteina chinasi di tipo 1 dipendente da calcio/calmodulina (CaMKI, nota anche come chinasi CaM I alfa) è una serina/treonina-proteina chinasi che appartiene alla famiglia CaMK. Funziona a valle di CaMKK nella cascata di segnalazione innescata dal calcio.
• CaMKI è un regolatore chiave dello sviluppo e della funzione neuronale. Promuove l'estensione assonale, la motilità del cono di crescita, la crescita dendritica e la formazione di spine/sinapsi nei neuroni dell'ippocampo. È essenziale per la potenziazione a lungo termine (LTP) e l'attivazione traduzionale dipendente da ERK2 a livello delle sinapsi.
• Oltre al sistema nervoso, CaMKI regola processi diversi tra cui la progressione del ciclo cellulare (transizione G1/S tramite ciclina-D1/CDK4), la differenziazione delle cellule muscolari (tramite fosforilazione di HDAC5 ed esportazione nucleare) e la produzione ormonale (regolazione dell'aldosterone sintasi nella corteccia surrenale).
• La chinasi fosforila numerosi substrati come CREB1, ATF1, CFTR, MYL9, SYN1, EIF4G3, ARHGEF7, MARK2 e NUMB, controllando così la trascrizione, l'endocitosi e la dinamica del citoscheletro.
• CaMKI è localizzata sia nel citoplasma che nel nucleo, in linea con i suoi ruoli nella trasduzione del segnale e nella regolazione trascrizionale.
• La proteina è ampiamente espressa nei tessuti, con un'espressione notevole nella corteccia surrenale.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione per l'attivazione e ubiquitinazione; è un enzima allosterico che lega la calmodulina in modo dipendente dal calcio.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione N-terminale (aa 1-100), che può essere conservata tra le specie ed è probabile che rilevi la conformazione nativa di CaMKI. Considerare la pre-adsorbimento con il peptide immunizzante per confermare la specificità.
• Per il Western blotting, validare l'anticorpo in lisati di tessuti/linee cellulari umani, di topo o di ratto dove CaMKI è espressa (es. cervello, ghiandola surrenale). Il peso molecolare previsto è di circa 41 kDa; assicurare condizioni ottimali di elettroforesi su gel e trasferimento.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. Eseguire una titolazione incrociata con l'antigene per determinare le concentrazioni operative ottimali. Includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Poiché CaMKI viene attivata da calcio/calmodulina, la stimolazione delle cellule con agenti che aumentano il Ca2+ intracellulare può migliorare il rilevamento nei saggi funzionali.

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