Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Anidrasi Carbonica 9 (CA9/G250) per WB, IHC-P, ELISA - Q16790

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Anidrasi Carbonica 9 (CA9/G250)

• L'anidrasi carbonica 9 (CA9, nota anche come CA-IX, CAIX, MN, G250) è un membro della famiglia delle anidasi carboniche che catalizza l'idratazione reversibile dell'anidride carbonica in bicarbonato e protoni, svolgendo un ruolo chiave nella regolazione del pH.
• È un enzima transmembrana localizzato prevalentemente sulla membrana cellulare e sulla membrana dei microvilli, ma è stato rilevato anche nel nucleo e nel nucleolo.
• L'espressione è fortemente limitata nei tessuti normali, con l'espressione più abbondante riscontrata nelle cellule epiteliali della mucosa gastrica; tuttavia, è fortemente upregolata in molte linee cellulari di carcinoma, rendendolo un noto antigene associato ai tumori.
• CA9 è coinvolto nell'adattamento delle cellule tumorali ai microambienti ipossici e acidi, favorendo la sopravvivenza e l'invasione delle cellule cancerose.
• La proteina contiene un dominio catalitico legante lo zinco e subisce diverse modifiche post-traduzionali, tra cui la formazione di legami disolfuro, glicosilazione e fosforilazione; la sua forma matura è anche soggetta a distacco proteolitico.
• Secondo UniProt, il peso molecolare calcolato è di circa 49,7 kDa e migra a circa 50 kDa in SDS-PAGE.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza peptidica interna (amminoacidi 200-300) della CA9 umana; considera la posizione dell'epitopo (dominio intracellulare) quando progetti gli esperimenti e selezioni i protocolli di permeabilizzazione o recupero dell'antigene.
• Per il Western blotting è prevista una banda principale intorno ai 50 kDa; convalida l'anticorpo in linee cellulari con livelli noti di espressione di CA9 (ad esempio linee cellulari di carcinoma) e ottimizza le condizioni di caricamento e bloccaggio.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), esegui il recupero dell'antigene con metodi mediati dal calore o enzimatici e titola l'anticorpo per minimizzare lo sfondo; includi controlli tessutali positivi e negativi appropriati.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere potenzialmente utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; considera l'abbinamento con altri anticorpi specifici per CA9 e convalida nella matrice di campione pertinente.
• Verifica sempre la specificità utilizzando modelli knockout o knockdown, se disponibili, e considera la reattività incrociata con altri membri della famiglia delle anidasi carboniche.

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