Anticorpo policlonale di coniglio anti-anidrasi carbonica 9 (CA9/G250) per WB, ELISA - Q16790

Specifiche principali del prodotto e parametri

Background biologico: Funzione e localizzazione dell'anidrasi carbonica 9 (CA9/G250)

• La CA9, nota anche come CAIX, MN o G250, è un'anidrasi carbonica transmembrana che catalizza l'idratazione reversibile dell'anidride carbonica in bicarbonato e protoni, svolgendo un ruolo chiave nell'omeostasi del pH.
• La proteina si localizza sulla membrana cellulare, in particolare sulla membrana dei microvilli, ed è presente anche nel nucleo e nel nucleolo.
• Nei tessuti normali, l'espressione è altamente limitata, con i livelli più abbondanti nelle cellule epiteliali della mucosa gastrica. Tuttavia, è frequentemente sovraespressa nelle linee cellulari di carcinoma, rendendola un utile marcatore associato ai tumori.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked, la fosforilazione e un ponte disolfuro, che possono influenzare la stabilità e la funzione.
• L'enzima richiede zinco come cofattore per l'attività catalitica, caratteristica delle alfa-anidrasi carboniche.
• Nomi alternativi come carbonato deidratasi IX, antigene G250 associato al carcinoma a cellule renali e p54/58N riflettono i suoi ruoli in fisiologia e oncologia.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 52–151 nel dominio extracellulare. Per il Western blot, si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali o frazioni di membrana in condizioni riducenti per rompere i ponti disolfuro.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere una titolazione per ottimizzare il rapporto segnale-rumore. Validare la reattività crociata con campioni di topo e ratto utilizzando controlli appropriati.
• A causa dell'espressione limitata nei tessuti normali, il rilevamento nei lisati tissutali può beneficiare di passaggi di arricchimento o dell'uso di linee cellulari di carcinoma come controllo positivo.
• Per applicazioni come IHC o IF, si raccomanda l'ottimizzazione poiché le conformazioni native potrebbero mascherare l'epitopo riconosciuto da questo anticorpo policlonale.

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