Anticorpo policlonale di coniglio anti-anidrasi carbonica 9 (CA9/G250) per WB - Q16790

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'anidrasi carbonica 9

• L'anidrasi carbonica 9 (CA9/CA-IX) è un membro della famiglia delle alfa-anidrasi carboniche e codifica un metalloenzima transmembrana contenente zinco.
• Catalizza l'idratazione reversibile dell'anidride carbonica in bicarbonato e protoni, svolgendo un ruolo fondamentale nella regolazione del pH.
• La CA9 è espressa principalmente nelle linee cellulari di carcinoma, con un'espressione limitata nei tessuti normali; i livelli più elevati si osservano nelle cellule epiteliali della mucosa gastrica.
• È localizzata nella membrana cellulare, nella membrana dei microvilli, nel nucleo e nel nucleolo.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione e glicosilazione, e contiene ponti disolfuro.
• Caratteristiche strutturali principali: peptide segnale, elica transmembrana e sito di legame dello zinco essenziale per la sua attività catalitica.
• Il peso molecolare è di circa 49,7 kDa (UniProt), ma viene spesso osservato a 50 kDa a causa della glicosilazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 52-151); si consiglia di testare l'anticorpo in condizioni non riducenti per il riconoscimento della conformazione nativa.
• Per il Western blot, validare utilizzando lisati di cellule di carcinoma umano trattate in condizioni di ipossia (ad es. HT-29, HeLa); si prevede una banda intorno a 50 kDa.
• L'IHC-P può richiedere il recupero antigenico e la titolazione per rilevare la colorazione di membrana e/o nucleare nei campioni tumorali.
• Per IF/ICC, includere fasi di permeabilizzazione per rilevare i pool intracellulari ed eseguire una co-colorazione con marcatori di membrana.
• Le prestazioni dell'ELISA possono essere valutate utilizzando la proteina CA9 ricombinante; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione.

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