Anticorpo monoclonale coniugato anti-Cas9 per WB, ELISA - Q99ZW2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di Cas9

• Cas9 (endonucleasi Cas9/Csn1 associata a CRISPR) è una DNA endonucleasi guidata da RNA che funge da proteina effettrice del sistema immunitario adattativo CRISPR-Cas di tipo II in Streptococcus pyogenes.
  Riferimenti correlati: PMID:21455174
• Nella via di interferenza CRISPR, Cas9 forma un complesso con un RNA CRISPR (crRNA) e un crRNA trans-attivante (tracrRNA). Questo complesso guidato da RNA doppio riconosce e taglia bersagli di DNA a doppio filamento complementari alla sequenza spaziatrice del crRNA.
• Il riconoscimento e il taglio del bersaglio richiedono una breve sequenza motivo adiacente al protospaziatore (PAM) (5’-NGG-3’ per SpCas9) immediatamente a valle del sito bersaglio. Il riconoscimento del PAM è essenziale per l'attività catalitica e aiuta a distinguere il DNA self dal non-self.
  Riferimenti correlati: PMID:24476820
• Oltre al taglio del DNA, Cas9 partecipa anche alla maturazione dei crRNA. Insieme a tracrRNA e all'ribonucleasi III dell'ospite, stabilizza il duplex pre-crRNA:tracrRNA per un corretto processamento, sebbene Cas9 stesso non abbia un ruolo catalitico nel taglio dell'RNA.
  Riferimenti correlati: PMID:24270795
• Cas9 è una proteina multi-dominio con attività di legame al DNA, endonucleasica ed esonucleasica. Dipende da ioni metallici bivalenti come magnesio o manganese per le sue funzioni nucleolitiche.
• Caratterizzata strutturalmente ad alta risoluzione, Cas9 mostra una flessibilità conformazionale che ne consente i ruoli nel legame all'RNA, nel rilassamento del DNA e nel taglio coordinato da parte dei suoi due domini nucleasici (RuvC e HNH).
• Il peso molecolare nativo di Cas9 è di circa 158 kDa, coerente con la sua ampia architettura multi-dominio.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 450–730 di Streptococcus pyogenes Cas9, una regione che include porzioni del dominio nucleasico RuvC. Considerare che l'anticorpo può riconoscere la proteina Cas9 sia nativa che denaturata.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto di Cas9 a lunghezza intera è ~158 kDa; convalidare la reattività nel sistema di campione rilevante (ad es., lisati di S. pyogenes o linee cellulari ingegnerizzate che esprimono SpCas9).
• Durante lo sviluppo di un ELISA, valutare le prestazioni dell'anticorpo contro la proteina Cas9 ricombinante o estratti cellulari. La cross-reattività indicata (Umano, Altro) suggerisce potenzialità per applicazioni che coinvolgono linee cellulari umane o tessuti che esprimono Cas9 esogeno.

CamelBio: Il Tuo Ponte di Approvvigionamento Tutto-in-Uno

CamelBio fornisce a produttori diagnostici, laboratori e istituti di ricerca un accesso completo a materie prime per IVD, servizi tecnici e consulenza, coprendo ogni fase dal concetto alla clinica. Per il campo in rapida evoluzione della diagnostica basata su CRISPR, CamelBio fornisce anticorpi monoclonali di alta qualità come questo anticorpo anti-Cas9, insieme a soluzioni complete di materie prime che includono coppie di anticorpi validate, reagenti sfusi ottimizzati e approvvigionamento su misura per target rari. Il nostro modello di fornitura integrato colma il divario tra l'innovazione nella ricerca e lo sviluppo di saggi clinici.