Anticorpo policlonale rabbit anti-CASK per WB, IF/ICC, ELISA - O14936

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CASK

• CASK è una proteina periferica della membrana plasmatica appartenente alla famiglia delle guanilato chinasi associate alla membrana (MAGUK), chiamata anche serina proteina chinasi calcio/calmodulina-dipendente o omologa della proteina lin-2.
• Funziona come chinasi serina/treonina indipendente da Mg²⁺ con struttura a scaffold multidominio che fosforila substrati come NRXN1, contribuendo all'ancoraggio delle proteine transmembrana sinaptiche e al traffico dei canali ionici. Riferimenti correlati: PMID:18423203
• Svolge un ruolo nello sviluppo neurale e nella regolazione dell'espressione genica tramite l'interazione con il fattore di trascrizione TBR1, e si associa al complesso LIN-10-LIN-2-LIN-7 per trasportare la subunità NR2B del recettore NMDA tramite KIF17 lungo i microtubuli.
• Si lega a diverse proteine di superficie cellulare, tra cui la proteina precursore dell'amiloide, neurexine e sindecani, e può mediare un legame tra la matrice extracellulare e il citoscheletro di actina tramite l'interazione con sindecano e la proteina 4.1 legante la spettrina.
• Si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nella membrana cellulare, il che riflette i suoi versatili ruoli di scaffold e di segnalazione.
• È espresso in modo ubiquitario, con livelli significativamente più elevati nel cervello rispetto a rene, polmone e fegato, e nel cervello e rene fetali rispetto a polmone e fegato fetali.
• Contiene un dominio SH3, molteplici moduli di interazione proteina-proteina, ed è soggetto a splicing alternativo; è fosforilato su molteplici residui, come identificato da approcci proteomici.
• Varianti genetiche in CASK sono associate a disabilità intellettiva e disturbi neurologici, a conferma del suo ruolo fondamentale nel neurosviluppo.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–300) di CASK umano; si consiglia di utilizzare questo anticorpo per rilevare CASK a lunghezza intera e possibilmente alcune isoforme, ma tenere conto della potenziale mascheramento dell'epitopo nei campioni fissati.
• Per western blotting, è attesa una banda intorno a 105 kDa; raccomandiamo di includere lisati positivi e negativi appropriati per confermare la specificità, oltre a verificare la coerenza tra lotti per confronti quantitativi.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, la localizzazione di CASK può apparire nucleare, citoplasmatica e associata alla membrana; le condizioni ottimali di fissazione e permeabilizzazione devono essere determinate empiricamente per il tipo cellulare studiato.
• Per ELISA, testare diversi tamponi di rivestimento e diluizioni dell'anticorpo; utilizzare una proteina CASK ricombinante standard per stabilire una curva di calibrazione affidabile.
• Trattandosi di un reagente policlonale, eseguire la titolazione di routine e l'ottimizzazione del blocco per ridurre il background non specifico in ogni applicazione.

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