Anticorpo Monoclonale Anti-Caspase-1 per WB, ELISA - P29466

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Caspase-1

• La Caspase-1, nota anche come interleuchina-1 beta convertasi (ICE/p45/IL1BC), è un membro della famiglia delle caspasi di proteasi cisteinico-aspartiche (proteasi tioliche) che svolge un ruolo centrale nelle risposte infiammatorie e nella morte cellulare programmata.
• È essenziale per la maturazione e la secrezione delle citochine pro-infiammatorie interleuchina-1 beta (IL-1β) e interleuchina-18 (IL-18) attraverso la clivaggio delle loro forme precursori in peptidi maturi biologicamente attivi.
  Riferimenti correlati: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• La Caspase-1 avvia la piroptosi, una forma litica di morte cellulare programmata, attraverso il clivaggio della gasdermina-D (GSDMD), con il riconoscimento del substrato che coinvolge un'interfaccia esosito distinta dal sito di clivaggio canonico.
  Riferimenti correlati: PMID:26375003, PMID:32051255, PMID:32109412, PMID:32553275
• Oltre a IL-1β/IL-18 e GSDMD, la Caspase-1 cliva anche altri substrati tra cui la caspasi-7 (CASP7) durante l'infezione batterica per promuovere la riparazione della membrana, la sintasi ciclica GMP-AMP (CGAS) per regolare l'immunità antivirale e la chinasi della sfingosina 2 (SPHK2) nelle cellule apoptotiche.
  Riferimenti correlati: PMID:22464733, PMID:28314590, PMID:20197547
• È principalmente localizzata nel citoplasma ma può anche associarsi alla membrana cellulare.
• L'espressione tissutale è più alta nella milza e nel polmone, con livelli più bassi rilevati nel fegato, cuore, intestino tenue, colon, timo, prostata, muscolo scheletrico, leucociti del sangue periferico, rene e testicolo; non è espressa nel cervello.
• Lo splicing alternativo genera isoforme che sono inattive nell'apoptosi e la proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, coniugazione simile all'ubiquitina e elaborazione da zimogeno a enzima attivo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 120–297 della Caspase-1 umana (NP_150634.1), che si trova all'interno della subunità p20 dell'enzima elaborato; questa regione può produrre anticorpi che riconoscono sia la proforma che i frammenti clivati, ma gli utenti dovrebbero validare nella loro specifica matrice di campione.
• Per il Western blot, il proenzima Caspase-1 a lunghezza intera migra a circa 45 kDa; potrebbero apparire bande aggiuntive corrispondenti alle subunità elaborate p20 e p10 a seconda dello stato di attivazione — ottimizzare di conseguenza le condizioni di carico e rilevamento.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare l'uso dell'immunogeno ricombinante come standard di riferimento o antigene di rivestimento, e verificare la reattività incrociata con altri membri della famiglia delle caspasi se la specificità è critica.
• La reattività incrociata è stata confermata per l'umano; per esperimenti che coinvolgono altre specie, eseguire una validazione indipendente poiché l'omologia di sequenza varia.

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