Anticorpo Policlonale Anti-Caspase-1 per WB, IF-P, ELISA - P29466

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Caspasi-1

• La Caspasi-1, nota anche come convertasi dell'interleuchina-1 beta (ICE) o p45, è una tiolproteasi e un membro chiave della famiglia delle cisteina-aspartico proteasi (caspasi).
• Dopo l'attivazione all'interno del complesso dell'inflammasoma, essa taglia proteoliticamente pro-IL-1β e pro-IL-18 nelle loro forme mature attive, avviando risposte proinfiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:15326478 PMID:15498465 PMID:1574116
• Taglia la gasdermina-D (GSDMD) per innescare la morte cellulare piroptotica; il riconoscimento del substrato dipende da un'interfaccia esositica, non da un sito di taglio consenso strettamente definito. Riferimenti correlati: PMID:26375003 PMID:32051255 PMID:32109412 PMID:32553275
• Altri substrati includono CASP7, che viene tagliata per promuovere la riparazione della membrana plasmatica durante l'infezione batterica; CGAS, che viene inattivato durante l'infezione da DNA virus; e SPHK2, che viene rilasciato nelle cellule apoptotiche. Riferimenti correlati: PMID:22464733 PMID:28314590 PMID:20197547
• È localizzata principalmente nel citoplasma e si associa alla membrana cellulare.
• La Caspasi-1 è espressa a livelli elevati nella milza e nel polmone, con livelli più bassi in fegato, cuore, intestino tenue, colon, timo, prostata, muscolo scheletrico, leucociti del sangue periferico, rene e testicolo; è assente nel cervello.
• La proteina subisce una maturazione autoproteolitica da uno zimogeno di 45 kDa ed è soggetta a fosforilazione, formazione di legami isopeptidici e coniugazione ubiquitina-simile. Lo splicing alternativo genera multiple isoforme.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione all'interno della subunità p20 della pro-caspasi-1 umana, il che indica che l'anticorpo può riconoscere sia la proenzima intera di 45 kDa sia i suoi frammenti processati. Nel Western blot, si consiglia di analizzare lisati di cellule trattate con attivatori dell'inflammasoma (es. LPS/ATP) per osservare l'attivazione della caspasi-1.
• Per l'immunofluorescenza (IF-P), convalidare l'anticorpo in linee cellulari o tessuti con espressione nota di CASP1 (es. macrofagi THP-1, milza) e ottimizzare la permeabilizzazione per rilevare le popolazioni localizzate nel citoplasma e sulla membrana.
• Nel ELISA, utilizzare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento per la quantificazione della caspasi-1; confermare la reattività contro la CASP1 umana ricombinante e la reattività crociata con gli omologhi di topo/ratto nella matrice di campione pertinente.

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