Anticorpo policlonale anti-Caspase-1 di coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - P29466

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Caspase-1

• La Caspase-1 è una proteasi tiolica che scinde i precursori dell'interleuchina-1 beta (IL1B) e dell'interleuchina 18 (IL18) nelle loro forme mature attive, svolgendo un ruolo centrale nelle risposte infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• Avvia anche la piroptosi, una via di morte cellulare programmata litica, scindendo la Gasdermina-D (GSDMD) e rilasciando il suo dominio N-terminale per formare pori sulla membrana. Riferimenti correlati: PMID:26375003
• L'attivazione della Caspase-1 avviene all'interno di complessi dell'infammasoma, che si assemblano in risposta a segnali associati a patogeni o danni, portando alla scissione autocatalitica indotta da prossimità del pro-enzima.
• Lo splicing alternativo produce multiple isoforme, incluse forme che privo di attività proteasica, sebbene i loro ruoli fisiologici rimangano non completamente caratterizzati.
• A livello subcellulare, la Caspase-1 si trova prevalentemente nel citoplasma, ma una frazione si associa alla membrana cellulare, il che potrebbe facilitare il suo ruolo nel processing di substrati prossimali alla membrana.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e l'ubiquitinazione, e l'enzima viene inizialmente sintetizzato come zimogeno inattivo che richiede la scissione proteolitica per l'attivazione.
• L'espressione tissutale è più alta nella milza e nel polmone, con rilevamento nel fegato, cuore, intestino tenue, colon, timo, prostata, muscolo scheletrico, leucociti del sangue periferico, rene e testicolo, ma non nel cervello.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione centrale (aa 201-300) della Caspase-1 umana. Per il Western blotting, il peso molecolare atteso della forma pro è di circa 45 kDa; dopo l'attivazione, possono essere osservati prodotti di scissione di dimensioni inferiori. Si consiglia di utilizzare lisati cellulari trattati con attivatori dell'infammasoma (es. LPS/ATP) per monitorare la scissione.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica, è richiesta la permeabilizzazione per rilevare la Caspase-1 citoplasmatica e localizzata sulla membrana. Includere controlli appropriati e convalidare il pattern di colorazione nel contesto cellulare pertinente.
• Questo anticorpo è previsto per avere reattività crociata con topo e ratto a causa dell'omologia di sequenza nella regione immunogenica; tuttavia, verificare la reattività nel proprio specifico sistema sperimentale attraverso test preliminari.

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