Anticorpo Monoclonale Anti-Caspase-3 per WB, ELISA - P42574

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Caspase-3

• La Caspase-3 (EC 3.4.22.56), nota anche come apopain, CPP32, Yama e SCA-1, è una principale caspase esecutrice nella via apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:18723680, PMID:20566630, PMID:23650375
• L'enzima viene sintetizzato come uno zimogeno inattivo (pro-caspasi-3) che subisce un processamento proteolitico da parte delle caspasi iniziatrici (CASP8, CASP9, CASP10) per generare le subunità attive p17 e p12. Riferimenti correlati: PMID:7596430, PMID:18723680
• Una volta attivata, la Caspase-3 clava numerosi substrati cellulari tra cui PARP1, SREBPs e caspasi-6/-7/-9 per eseguire l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:10497198, PMID:16374543, PMID:7596430
• Oltre all'apoptosi, la Caspase-3 media anche la piroptosi clavando la gasdermina-E (GSDME) e inibisce la produzione di interferoni di tipo I durante l'infezione virale prendendo di mira CGAS, IRF3 e MAVS. Riferimenti correlati: PMID:35338844, PMID:35446120, PMID:30878284
• La proteina si localizza principalmente nel citoplasma ed è altamente espressa nel polmone, milza, cuore, fegato, rene e cellule immunitarie.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione, S-nitrosilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua attività e stabilità.
• La Caspase-3 svolge anche ruoli nella potatura degli assoni, nell'adesione cellulare attraverso la clivaggio di RET e DSG2, e nell'esposizione della fosfatidilserina tramite il clivaggio della scramblasi. Riferimenti correlati: PMID:21357690, PMID:17559062, PMID:23845944, PMID:33725486

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 29–175, che coprono la subunità grande p17 della Caspase-3. Nel Western blotting, l'anticorpo può riconoscere sia la pro-caspasi-3 (circa 32 kDa) sia la subunità grande attiva clivata (circa 17–20 kDa); si raccomandano controlli appropriati di induzione dell'apoptosi (es. trattamento con staurosporina) per verificare il rilevamento delle forme processate.
• La convalida KO garantisce un'elevata specificità per il bersaglio; considerare l'incorporazione di linee cellulari o tessuti knockout come controlli negativi nei vostri esperimenti.
• Per l'ELISA, convalidare la coppia di anticorpi nelle condizioni dell'analisi previste e confermare la sensibilità con la proteina ricombinante Caspase-3.
• La reattività crociata con il mouse consente studi comparativi tra modelli di apoptosi umana e murina.

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