Anticorpo Policlonale Anti-Caspasi-3 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42574

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Caspasi-3

• La Caspasi-3 è una proteasi tiolica che agisce come una delle principali caspasi effettrici nella fase di esecuzione dell'apoptosi. Dopo l'attivazione da parte delle caspasi iniziatrici (CASP8, CASP9 e/o CASP10), media l'apoptosi catalizzando il taglio di numerosi substrati proteici. Riferimenti correlati: PMID:18723680 PMID:20566630 PMID:23650375
• Un evento apoptotico caratteristico è il taglio proteolitico della poli(ADP-ribosio) polimerasi PARP1 al legame Asp216-Gly217. La Caspasi-3 taglia e attiva anche caspasi a valle come CASP6, CASP7 e CASP9, e inattiva l'interleuchina-18 (IL18). Riferimenti correlati: PMID:10497198 PMID:16374543 PMID:7596430 PMID:37993714 PMID:9334240
• Oltre all'apoptosi, la caspasi-3 è coinvolta nella piroptosi mediando il taglio e l'attivazione della gasdermina-E (GSDME), collegandola a vie di morte cellulare infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:35338844 PMID:35446120
• La Caspasi-3 contribuisce a ruoli non apoptotici, inclusa la potatura assonale durante lo sviluppo cerebrale, la regolazione dell'adesione cellulare tramite il taglio di RET e proteine desmosomiali (es. DSG2, JUP), e il taglio della huntingtina. Riferimenti correlati: PMID:8696339 PMID:21357690 PMID:17559062
• Sotto stress ossidativo, la Caspasi-3 taglia e inibisce la serina/treonina-proteina chinasi AKT1, e durante l'infezione virale, taglia le proteine antivirali CGAS, IRF3 e MAVS per prevenire la sovrapproduzione di citochine. Riferimenti correlati: PMID:23152800 PMID:30878284
• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma ed è espressa ad alti livelli in polmone, milza, cuore, fegato e rene, con livelli moderati nel cervello e nel muscolo scheletrico, e bassi nel testicolo. È più abbondante nelle cellule del sistema immunitario.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 55–160 della Caspasi-3 umana, comprendendo parte del pro-dominio e della subunità grande; considerare che questo anticorpo può riconoscere sia la forma pro-inattiva che la forma attiva tagliata.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 32 kDa, ma possono apparire frammenti di taglio (es. ~17 kDa e ~12 kDa) a seconda dello stato di attivazione e della preparazione del campione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), convalidare la colorazione in tessuti positivi noti (es. milza, timo) e includere controlli appropriati per confermare la specificità.
• Data l'elevata identità di sequenza tra uomo, topo e ratto, è attesa una reattività crociata; tuttavia, la diluizione ottimale e le condizioni di incubazione dovrebbero essere determinate empiricamente per ciascuna specie e applicazione.
• Conservare come raccomandato (spedizione in sacchetto di ghiaccio) ed evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento per mantenere la stabilità e le prestazioni dell'anticorpo.

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