Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Caspase-6 per WB, IF/ICC, ELISA - P55212

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Caspase-6

• La Caspase-6 (Mch-2) è una proteasi cisteina-aspartico codificata dal gene CASP6 (GeneID 839), con un peso molecolare di ~33 kDa.
• Agisce come una caspasi esecutrice non canonica durante l'apoptosi: localizzandosi nel nucleo, cliva le proteine strutturali nucleari laminina A (LMNA) e NUMA1, inducendo l'inspessimento e la frammentazione nucleare. Il clivaggio della laminina A è specificamente richiesto per la condensazione della cromatina e la disassemblaggio nucleare. Riferimenti correlati: PMID:11953316, PMID:17401638, PMID:8663580
• Upon loss of AMPK‑mediated phosphorylation, caspase‑6 cleaves BID, triggering cytochrome c release and promoting hepatocyte apoptosis in nonalcoholic steatohepatitis. Riferimenti correlati: PMID:32029622
• Nella via intrinseca dell'apoptosi, la caspasi‑6 media il clivaggio di RIPK1, contribuendo al segnale apoptotico. Riferimenti correlati: PMID:22858542
• Cliva i fattori di trascrizione NF‑kappa‑B e CREBBP, modulando così i programmi infiammatori e trascrizionali durante la morte cellulare. Riferimenti correlati: PMID:10559921, PMID:14657026
• Indipendentemente dalla sua attività proteasica, la caspasi‑6 funge da ponte facilitando la PANoptosi mediata da ZBP1 (piroptosi, apoptosi, necroptosi) potenziando l'interazione tra RIPK3 e ZBP1, portando all'attivazione dell'inflammasoma. Riferimenti correlati: PMID:32298652
• La caspasi‑6 svolge anche un ruolo antivirale clivando proteoliticamente la proteina N dei coronavirus (es. MERS‑CoV, SARS‑CoV, SARS‑CoV‑2), sopprimendo la segnalazione dell'interferone di tipo I e potenziando la replicazione virale. Riferimenti correlati: PMID:18155731, PMID:35922005
• La proteina risiede sia nel citoplasma che nel nucleo e la sua attività è regolata dal processamento proteolitico, dalla fosforilazione e dalla palmitoilazione (lipoproteina).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide all'interno degli aminoacidi 100‑200 della caspasi‑6 umana (P55212), che si trova nella subunità grande p20; l'anticorpo può riconoscere sia la proforma di ~33 kDa sia il frammento di clivaggio p20.
• Per il Western blotting, la banda prevista per la caspasi‑6 a lunghezza intera è ~33 kDaDa; dopo l'attivazione, potrebbero apparire frammenti più piccoli (~20 kDa e ~10 kDa). Validare il rilevamento in lisati apoptotici rispetto a non apoptotici.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, ci si aspetta una colorazione doppia citoplasmatica-nucleare; la translocazione al nucleo può essere un marcatore dell'induzione dell'apoptosi. Ottimizzare la fissazione/permeabilizzazione per un rilevamento affidabile.
• L'anticorpo è adatto per ELISA; considerare l'abbinamento con un secondo anticorpo che riconosca un epitopo distante per lo sviluppo di saggi a sandwich.
• La reattività incrociata è stata confermata per umano e mouse; per altre specie, si raccomanda l'allineamento della sequenza della regione immunogenica e la validazione sperimentale.

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