Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Caspasi-6 per WB, IHC-P, ELISA - P55212

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Caspasi-6

• La Caspasi-6 è una proteasi della cisteina espressa come zimogeno, che subisce un taglio autocatalitico per l'attivazione. È soggetta a splicing alternativo, palmitoilazione e fosforilazione, che ne regolano l'attività e la localizzazione.
• Svolge ruoli essenziali nella morte cellulare programmata (apoptosi), nella degenerazione assonale, nello sviluppo e nell'immunità innata (PubMed:19133298, PubMed:22858542, PubMed:27032039).
  Riferimenti correlati: PMID:19133298, PMID:22858542, PMID:27032039
• In qualità di caspasi esecutrice non canonica, si localizza nel nucleo e scinde NUMA1 e la lamina A/LMNA, inducendo il restringimento e la frammentazione nucleare. La scissione della lamina A è necessaria per la condensazione della cromatina e la disassemblazione nucleare durante l'apoptosi (PubMed:11953316, PubMed:17401638, PubMed:8663580).
  Riferimenti correlati: PMID:11953316, PMID:17401638, PMID:8663580
• La Caspasi-6 scinde i fattori di trascrizione NF-kappa-B e CREBBP, nonché le proteine scramblasi dei fosfolipidi XKR4 e XKR9, influenzando l'espressione genica e la dinamica delle membrane (PubMed:10559921, PubMed:14657026).
  Riferimenti correlati: PMID:10559921, PMID:14657026
• Nella PANoptosi, la Caspasi-6 agisce come impalcatura molecolare indipendentemente dalla sua attività proteasica, interagendo con RIPK3 e ZBP1 per attivare piroptosi, apoptosi e necroptosi (PubMed:32298652).
  Riferimenti correlati: PMID:32298652
• Nel fegato, promuove l'apoptosi degli epatociti scindendo BID in condizioni di disregolazione di AMPK, contribuendo alla steatoepatite non alcolica (PubMed:32029622).
  Riferimenti correlati: PMID:32029622
• (Infezione microbica) Scinde proteoliticamente le proteine N dei coronavirus (MERS-CoV, SARS-CoV, SARS-CoV-2), modulando la replicazione virale mediante l'inibizione della traslocazione nucleare di IRF3 e la soppressione della segnalazione dell'IFN (PubMed:18155731, PubMed:35922005).
  Riferimenti correlati: PMID:18155731, PMID:35922005
• A livello subcellulare, la Caspasi-6 si trova sia nel citoplasma sia nel nucleo; la localizzazione nucleare è fondamentale per la sua funzione esecutrice nell'apoptosi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 150-250 della Caspasi-6 umana. Questa regione centrale è conservata e supporta la reattività crociata con topo e ratto.
• Per il Western blot, prevedere una banda intorno a 33 kDa. Utilizzare condizioni riducenti e convalidare l'espressione nel lisato cellulare o tissutale di interesse; valutare l'inclusione di controlli positivi come cellule apoptotiche.
• Nella IHC-P, è possibile osservare una colorazione nucleare e citoplasmatica. Il recupero antigenico e la diluizione dell'anticorpo devono essere ottimizzati empiricamente.
• Per l'ELISA, si raccomanda l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione diretto contro un epitopo non sovrapposto, per migliorare la sensibilità del test.
• La reattività crociata dell'anticorpo riportata con topo e ratto consente studi traslazionali; verificare sempre la specificità nel sistema modello pertinente.

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