Anticorpo policlonale di coniglio anti-Caspasi-6 per WB, ELISA - P55212

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Caspasi-6

• La Caspasi-6 è una proteasi cisteinica che svolge ruoli essenziali nell'apoptosi, nella degenerazione assonale, nello sviluppo e nell'immunità innata. Riferimenti correlati: PMID:19133298, PMID:22858542, PMID:27032039
• Agisce come caspasi esecutrice non canonica durante l'apoptosi, localizzandosi nel nucleo dove scinde le proteine strutturali nucleari NUMA1 e laminina A/LMNA, inducendo il restringimento e la frammentazione del nucleo. Riferimenti correlati: PMID:11953316, PMID:17401638, PMID:8663580
• La scissione della laminina A/LMNA è necessaria per la condensazione della cromatina e la disgregazione nucleare durante l'esecuzione apoptotica. Riferimenti correlati: PMID:11953316
• La Caspasi-6 regola il danno epatico promuovendo l'apoptosi degli epatociti; quando non è fosforilata da AMPK, scinde BID, portando al rilascio del citocromo c e contribuendo alla steatoepatite non alcolica. Riferimenti correlati: PMID:32029622
• È coinvolta nell'apoptosi intrinseca mediando la scissione di RIPK1 e scinde fattori di trascrizione quali NF-kappa-B e CREBBP. Riferimenti correlati: PMID:22858542, PMID:10559921, PMID:14657026
• Oltre all'apoptosi, la Caspasi-6 partecipa alla PANoptosi (piroptosi, apoptosi, necroptosi) indipendentemente dalla sua attività proteasica, fungendo da piattaforma per la morte cellulare mediata da ZBP1 durante l'infezione virale. Riferimenti correlati: PMID:32298652
• Svolge un ruolo essenziale nella degenerazione assonale durante il pruning dello sviluppo (per analogia).
• Durante l'infezione microbica, scinde proteoliticamente la proteina N dei coronavirus, inclusi MERS-CoV, SARS-CoV e SARS-CoV-2, modulando la segnalazione dell'IFN per favorire la replicazione virale. Riferimenti correlati: PMID:18155731, PMID:35922005

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza all'interno della subunità matura della caspasi-6 (aa 194-293), il che può favorire il rilevamento sia della pro-forma sia dei frammenti attivi scissi. Si consiglia di verificare la specificità nei lisati cellulari pertinenti.
• Per il Western blot, può essere osservata una banda intorno a 33kDa (pro-forma) e, possibilmente, bande a peso molecolare inferiore (~18kDa e ~11kDa, corrispondenti alle subunità attive), a seconda dell'induzione dell'apoptosi.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nel proprio saggio utilizzando controlli positivi e negativi, ad esempio cellule non trattate rispetto a cellule apoptotiche.
• Per l'ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di cattura adatto può migliorare la sensibilità. Si raccomanda una titolazione.
• È stata segnalata una reattività crociata con la Caspasi-6 murina; verificare l'omologia di sequenza se si intende estendere l'uso ad altre specie.
• Conservare secondo le raccomandazioni relative alla spedizione in borsa del ghiaccio; per la conservazione a lungo termine, conservare a -20°C o -80°C in aliquote per evitare cicli di congelamento-scongelamento.

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