Anticorpo policlonale di coniglio anti-Caspasi-7 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55210

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Caspasi-7

• La Caspasi-7 (nota anche come MCH3, CMH-1, ICE-LAP3) è una proteasi della cisteina e dell'acido aspartico codificata dal gene CASP7; è stata descritta un'isoforma derivante dallo splicing alternativo priva di attività enzimatica.
• In qualità di caspasi effettrice nella fase esecutiva dell'apoptosi, viene scissa e attivata dalle caspasi iniziatrici (CASP8, CASP9, CASP10) e media la scissione di substrati quali CLSPN, PARP1, PTGES3 e YY1, promuovendo la morte cellulare programmata. Riferimenti correlati: PMID:10497198 PMID:16123041 PMID:16374543
• Mostra una marcata preferenza per le sequenze consenso DEVD, ma può accogliere motivi non canonici, evidenziando la versatilità dei substrati. Riferimenti correlati: PMID:12824163 PMID:15314233 PMID:17697120
• Regola le risposte infiammatorie e la piroptosi: dopo l'attivazione da parte di CASP1 nelle cellule epiteliali intestinali, scinde e attiva SMPD1 per generare ceramidi che riparano le membrane e contrastano i pori della gasdermina-D.
• Partecipa inoltre alla morte cellulare mediata dalla granzima negli epatociti, dove viene attivata da GZMB e secreta per scindere SMPD1, bilanciando la formazione dei pori da parte della perforina.
• La localizzazione subcellulare comprende il citoplasma, il citosol, il nucleo e la secrezione nello spazio extracellulare, in linea con i suoi diversi ruoli nella proteolisi e nella riparazione delle membrane.
• È altamente espressa nei polmoni, nel muscolo scheletrico, nel fegato, nei reni, nella milza e nel cuore; presenta un'espressione moderata nei testicoli ed è assente nel cervello.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione; viene sintetizzata come zimogeno inattivo che richiede un processamento proteolitico per l'attivazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione centrale della Caspasi-7 (aa 150–250), pertanto può rilevare sia le forme precursori sia quelle scisse; validare in sistemi campione pertinenti per confermare la specificità.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è di circa 34 kDa; in seguito all'attivazione può essere osservato uno spostamento della banda, pertanto si consiglia di includere controlli indotti e non indotti.
• Le applicazioni IHC-P e IF/ICC possono richiedere un'ottimizzazione del recupero antigenico; si raccomanda di testare sia sezioni incluse in paraffina sia sezioni congelate.
• Le applicazioni ELISA possono essere sviluppate in saggi sandwich se abbinate a un anticorpo di cattura idoneo; eseguire controlli di reattività crociata nei confronti dei membri correlati della famiglia delle caspasi.

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