Anticorpo Policlonale Coniglio Anti-Caspase-8 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14790

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Caspase-8

• CASP8 codifica una proteasi tiolica che funge da interruttore molecolare per l'apoptosi, la necroptosi e la piroptosi, ed è essenziale per prevenire danni tissutali durante lo sviluppo embrionale e l'età adulta. Riferimenti correlati: PMID:23516580, PMID:35338844, PMID:35446120
• Nell'apoptosi estrinseca, CASP8 viene reclutato ai recettori di morte (FAS/TNFRSF1A) tramite l'adattatore FADD, formando il complesse di segnalazione indotto dalla morte (DISC) in cui subisce l'attivazione proteolitica. Riferimenti correlati: PMID:8681376, PMID:8681377, PMID:9184224
• CASP8 attivata cliva e attiva le caspasi effettrici a valle (CASP3, CASP4, CASP6, CASP7, CASP9, CASP10) nonché BID, collegando la segnalazione del recettore di morte alla via mitocondriale dell'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:16916640, PMID:8962078, PMID:9006941
• CASP8 agisce anche come regolatore negativo della necroptosi clivando RIPK1 in Asp-324, limitando la necroptosi indotta da TNF e l'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:31827280, PMID:31827281
• Nella piroptosi, CASP8 cliva gasdermin-C e -D (GSDMC, GSDMD), generando frammenti N-terminali che formano pori e innescano la permeabilizzazione della membrana. Riferimenti correlati: PMID:32929201, PMID:34012073
• A livello subcellulare, CASP8 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nelle proiezioni cellulari come le lamellipodia.
• Le isoforme 1, 5 e 7 sono ampiamente espresse, con i livelli più alti nei leucociti del sangue periferico, nella milza, nel timo e nel fegato; le isoforme con splicing alternativo prive di attività catalitica possono agire come inibitori dominanti-negativi della cascata delle caspasi. Riferimenti correlati: PMID:12010809

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 376–479) della Caspase-8 umana; sia la forma a lunghezza intera che i frammenti clivati possono essere rilevati in Western blot—validare i pattern delle bande nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda vicino a 55 kDa per il proenzima; potrebbero apparire bande aggiuntive che rappresentano frammenti clivati attivi dopo l'induzione dell'apoptosi.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), considerare il recupero dell'antigene con tampone citrato o Tris-EDTA e ottimizzare le condizioni di blocco per il tessuto.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), regolare la fissazione e la permeabilizzazione per bilanciare l'accessibilità dell'antigene e la conservazione morfologica.
• L'anticorpo è previsto che abbia reattività crociata con topo e ratto in base ai dati del produttore; eseguire l'allineamento delle sequenze per confermare la conservazione dell'epitopo se si lavora con altre specie.

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