Anticorpo Policlonale Anti-Caspase-9 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55211

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Caspase-9

• La Caspase-9 è una proteasi cisteinica della famiglia delle caspasi che funge da caspasi iniziale nella via intrinseca dell'apoptosi.
• Una volta legata ad Apaf-1, la caspasi-9 viene attivata e successivamente cliva e attiva le caspasi effettrici, come la caspasi-3 e la caspasi-7, per eseguire l'apoptosi.
• La Caspase-9 promuove l'apoptosi indotta da danni al DNA in modo dipendente da ABL1/c-Abl e cliva proteoliticamente la polimerasi poli(ADP-ribosio) (PARP).
• La Caspase-9 cliva BIRC6 a seguito dell'inibizione del legame BIRC6-caspasi da parte di DIABLO/SMAC. Riferimenti correlati: PMID:36758105, PMID:36758106
• Un isoforma generata per splicing alternativo, Caspase-9S, manca di attività catalitica e agisce come inibitore dominante-negativo dell'enzima a lunghezza intera.
• Espressa ubiquitariamente con i livelli più alti nel cuore (specificamente nei miociti), moderati nel fegato, muscolo scheletrico e pancreas, e bassi in altri tessuti.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e la coniugazione all'ubiquitina, che regolano la sua attività; viene sintetizzata come zimogeno che richiede un processo proteolitico.
• Parole chiave: Apoptosi, Idrolasi, Proteasi, Proteasi tiolica, Fosfoproteina, Coniugazione Ubl, Zimogeno, Splicing alternativo, Struttura 3D.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 139-416 della caspasi-9 umana, che include la subunità grande; l'anticorpo potrebbe rilevare sia la proforma a lunghezza intera (~46 kDa) che le forme processate. Includere appropriati marcatori di peso molecolare.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati di tessuto cardiaco o epatico come controlli positivi, data l'espressione relativamente alta in questi tessuti.
• Nell'immunoistochimica, validare la colorazione in sezioni di cuore o fegato e ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene per tessuti inclusi in paraffina e fissati in formalina.
• Per l'immunofluorescenza, la caspasi-9 si localizza principalmente nel citoplasma; considerare una colorazione combinata con marcatori mitocondriali per valutare l'attivazione apoptotica.

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