Anticorpo policlonale anti-CASR per WB, IHC-P, ELISA - P41180

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CASR

• Il recettore extracellulare sensibile al calcio (CASR), noto anche come recettore 1 sensibile al calcio delle cellule paratiroidee (PCaR1), è codificato dal gene CASR (nomi alternativi: GPRC2A, PCAR1) e appartiene alla famiglia dei recettori accoppiati alle proteine G. Lo splicing alternativo dà origine a molteplici isoforme.
• Il CASR agisce come regolatore chiave dell'omeostasi sistemica del calcio rilevando le variazioni della concentrazione extracellulare di calcio. Nella ghiandola paratiroidea, l'aumento del calcio circolante attiva il CASR, determinando una diminuzione della secrezione dell'ormone paratiroideo (PTH). Nel rene, modula il riassorbimento tubulare renale del calcio. Riferimenti correlati: PMID:17555508 PMID:19789209 PMID:21566075
• In seguito al legame con il ligando, il CASR subisce cambiamenti conformazionali che attivano la segnalazione attraverso molteplici sottotipi di proteine G. Può accoppiarsi a G(q)/G(11) per attivare la fosfolipasi C-beta (generando DAG e IP3) e a G(i)/G(o) per inibire l'adenilato ciclasi; la via specifica dipende dal contesto cellulare. Riferimenti correlati: PMID:38632411 PMID:7759551
• La piena attivazione del recettore segue un meccanismo di co-agonismo, in cui gli amminoacidi aromatici (ad es., Trp, Phe) agiscono in modo concertato con cationi bivalenti come calcio o magnesio. Riferimenti correlati: PMID:27386547 PMID:27434672 PMID:32817431
• Oltre alla funzione di sensore del calcio, è stato dimostrato che il CASR attiva l'inflammasoma NLRP3 tramite la riduzione dei livelli di cAMP mediata da G(i)/G(o), alleviando così l'inibizione di NLRP3. Riferimenti correlati: PMID:32843625
• Il recettore è localizzato prevalentemente nella membrana cellulare, in linea con il suo ruolo nel rilevamento dei segnali extracellulari.
• L'espressione tissutale è ampia, con rilevamento nel lobo temporale, nel lobo frontale, nel lobo parietale, nell'ippocampo, nel cervelletto, nel rene, nel polmone, nel fegato, nel cuore, nel muscolo scheletrico e nella placenta.
• Tra le principali modifiche post-traduzionali e caratteristiche strutturali vi sono i ponti disolfuro, la glicosilazione, la fosforilazione e la coniugazione con ubiquitina, che possono influenzare il trasporto e la funzione del recettore. Contiene un peptide segnale e sette eliche transmembrana caratteristiche dei GPCR.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 180–536 del CASR umano, una regione all'interno dell'ampio dominio extracellulare che è fondamentale per il legame con il ligando. Questo design probabilmente genera anticorpi in grado di riconoscere il recettore nativo.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto del CASR è di circa 121 kDa. Tuttavia, l'ampia glicosilazione e altre modifiche possono determinare un peso molecolare apparente superiore. Validare la banda di interesse utilizzando controlli appropriati e, se necessario, considerare esperimenti di deglicosilazione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), possono essere necessari metodi di recupero antigenico per rendere accessibili gli epitopi nei tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina. Ottimizzare le condizioni di colorazione utilizzando tessuti di controllo positivi e negativi.
• Si prevede che l'anticorpo presenti reattività crociata con il CASR umano, murino e di ratto. Quando si lavora con modelli animali, confermare la reattività nella specie pertinente testando un campione di controllo.
• Per le applicazioni ELISA, la natura policlonale di questo anticorpo può garantire un'elevata sensibilità. Può essere utilizzato sia come anticorpo di cattura sia come anticorpo di rilevazione, ma le prestazioni devono essere verificate con standard proteici ricombinanti o nativi.

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