Anticorpo policlonale anti-catalasi per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04040

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della catalasi

• La catalasi (CAT) è un enzima antiossidante ubiquo contenente eme che catalizza la decomposizione del perossido di idrogeno (H₂O₂) in acqua e ossigeno, proteggendo le cellule dal danno ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:7882369
• Funziona anche come mitogeno, promuovendo la crescita di diversi tipi cellulari tra cui linfociti T, linfociti B, cellule di leucemia mieloide, cellule di melanoma e fibroblasti. Riferimenti correlati: PMID:7882369
• La catalasi è localizzata principalmente nella matrice dei perossisomi, dove neutralizza l'H₂O₂ generato dalle ossidasi perossisomiali.
• L'enzima contiene un gruppo prostetico eme, lega ferro e NADP e viene classificato come ossidoriduttasi con attività perossidasica.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolarne l'attività e la stabilità.
• Il peso molecolare previsto della catalasi umana è di circa 60 kDa (59756 Da secondo UniProt), in linea con la rilevazione di una banda di 60 kDa nel western blotting.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un frammento ricombinante che copre la regione N-terminale (amminoacidi 1-225) della catalasi umana. Questa regione è probabilmente esposta sulla superficie e conservata, rendendola un bersaglio adatto per la generazione di anticorpi che rilevano sia la proteina endogena che quella ricombinante.
• Per il western blotting (WB) è prevista una banda a circa 60 kDa; validare l'anticorpo utilizzando lisati di controllo positivo appropriati (ad esempio, linee cellulari/tessuti di uomo, topo o ratto noti per esprimere catalasi).
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e permeabilizzazione, poiché la catalasi è localizzata nei perossisomi. Utilizzare sezioni di tessuto o cellule con alto contenuto di perossisomi, come fegato o rene.
• Per l'ELISA, valutare l'utilizzo dell'anticorpo come anticorpo di cattura o di rilevazione in formato sandwich; l'abbinamento con un altro anticorpo anti-catalasi può migliorare la sensibilità. Verificare sempre le prestazioni nelle condizioni specifiche del tuo test.

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