Anticorpo policlonale coniglio anti-Cathepsin G per WB, IHC-P, ELISA - P08311

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Cathepsin G

• Cathepsin G (CTSG) è una proteasi serinica con specificità simile alla tripsina e alla chimotripsina, che cliva preferibilmente dopo Phe, Tyr, Trp e Leu in posizione P1 e mostra una preferenza per residui caricati negativamente in P2′ (PubMed:29652924, PubMed:8194606).
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• Esibisce una potente attività antimicrobica contro batteri Gram-negativi (N. gonorrhoeae, P. aeruginosa) e Gram-positivi (L. monocytogenes, S. aureus), nonché contro M. tuberculosis, in gran parte indipendente dalla sua funzione proteasica (PubMed:2116408, PubMed:2117044, PubMed:1937776, PubMed:15385470).
  Riferimenti correlati: PMID:2116408 PMID:2117044 PMID:1937776 PMID:15385470

• Cathepsin G modula l'immunità adattiva e innata legandosi e stimolando le cellule B, le cellule T CD4⁺ e CD8⁺, e potenziando la citotossicità delle cellule NK attraverso la sua attività enzimatica (PubMed:7842483, PubMed:9000539, PubMed:9536127).
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• La proteasi è necessaria per il reclutamento e l'attivazione delle piastrine mediati dal recettore F2RL3/PAR4; induce anche direttamente l'aggregazione piastrinica, un effetto fortemente potenziato dall'elastasi dei neutrofili (ELANE) (PubMed:10702240, PubMed:3390156, PubMed:25211214, PubMed:9111081).
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• Cliva un'ampia gamma di substrati fisiologici tra cui il complemento C3, il recettore della trombina F2R/PAR1 (agendo come agonista o inibitore a seconda del sito), i fattori della coagulazione F8 e F10, le citochine pro-infiammatorie IL36G e IL33, e la proteina di superficie dei leucociti CD43 (PubMed:1861080, PubMed:7744748, PubMed:18217133, PubMed:8920993, PubMed:30804664, PubMed:22307629, PubMed:18586676).
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• La proteina si trova in più compartimenti subcellulari, inclusi i granuli citoplasmatici dei neutrofili, secreta extracellularmente, ed è stata rilevata anche nella membrana cellulare, nel citoplasma, nel citosol, nel lisosoma e nel nucleo.

• L'espressione tissutale è predominante nei neutrofili (a livello proteico) e in minor misura nelle cellule B (PubMed:3799965, PubMed:15100291).
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• Cathepsin G è una glicoproteina che contiene legami disolfuro intramolecolari; viene sintetizzata come uno zimogeno inattivo e processata proteoliticamente nell'enzima maturo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting (WB), ci si aspetta che l'anticorpo rilevi una banda vicino a 29 kDa corrispondente alla cathepsin G matura; possono essere osservate anche pro-forme o varianti glicosilate differenzialmente. Consigliamo di ottimizzare la preparazione del campione e le concentrazioni di carico nel vostro specifico modello sperimentale.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene mediante metodi mediati dal calore (es. tampone citrato o EDTA, pH 6,0 o 9,0) può migliorare la colorazione. Validare l'anticorpo su tessuti di controllo positivi noti per esprimere la cathepsin G (es. tonsilla umana, milza) insieme a controlli negativi.
• Per l'ELISA, la natura policlonale può fornire un'elevata sensibilità, ma è fondamentale valutare la coerenza tra i lotti e la potenziale reattività incrociata. L'abbinamento con un anticorpo di cattura appropriato o il suo utilizzo come reagente di rilevamento sono entrambe strategie valide.
• L'immunogeno rientra nel dominio catalitico (aa 75–190), suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce sia l'enzima pro- che quello maturo; pertanto, occorre prestare attenzione quando si interpretano i dati da sistemi in cui la pro-cathepsin G è abbondante.

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