Anticorpo policlonale Anti-Catepsina K (CTSK) per WB e ELISA - P43235

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Catepsina K

• La Catepsina K (CTSK), nota anche come catepsina O, O2 o X, è una proteasi cisteinica lisosomiale della famiglia della papaïna, sintetizzata come zimogeno inattivo che subisce attivazione proteolitica.
• Svolge un ruolo fondamentale nel riassorbimento osseo osteoclastico degradando le proteine della matrice ossea, incluso il collagene di tipo I, ed è essenziale per il normale rimodellamento osseo.
• CTSK mostra una potente attività endoproteasica verso il fibrinogeno a pH acido, suggerendo un ruolo nella degradazione della matrice extracellulare anche al di fuori delle ossa.
• Nella tiroide, CTSK è coinvolta nel rilascio dell'ormone tiroideo tiroxina (T4) attraverso la proteolisi limitata della tireoglobulina nel lume del follicolo tiroideo (PubMed:11082042). Riferimenti correlati: PMID:11082042
• La proteina è espressa prevalentemente negli osteoclasti (PubMed:7805878) e nelle cellule epiteliali tiroidee (PubMed:11082042). Riferimenti correlati: PMID:7805878, PMID:11082042
• Subcellularmente, CTSK si localizza nei lisosomi, viene secreta nello spazio extracellulare e può associarsi alla membrana cellulare apicale nelle cellule polarizzate.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione e formazione di legami disolfuro, importanti per la stabilità e l'attività; l'enzima maturo è una glicoproteina.
• Le mutazioni in CTSK sono associate alla picnodisostosi, una displasia scheletrica autosomica recessiva caratterizzata da ossa dense (osteosclerosi).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Poiché l'immunogeno è stato generato contro un frammento ricombinante (aa 115-329) che comprende il dominio catalitico maturo, è previsto che l'anticorpo riconosca sia la forma pro- che la CTSK matura attiva in condizioni di Western blot denaturante (WB); tuttavia, la rilevazione della proteina endogena può richiedere ottimizzazione in base ai livelli di espressione tissutale.
• Per l'analisi Western blot, si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e aggiungere inibitori di proteasi durante la preparazione del campione per prevenire la degradazione di CTSK. Il peso molecolare previsto della pro-enzima è ~37 kDa, ma le forme mature clivate possono avere dimensioni inferiori.
• La reattività incrociata riportata con il topo suggerisce l'utilizzabilità per studi traslazionali che utilizzano modelli murini di metabolismo osseo. Validare la reattività incrociata nel vostro sistema sperimentale specifico.
• Per ELISA, valutare di abbinare questo anticorpo con un anticorpo di cattura o coniugarlo direttamente per la rilevazione; si ricorda che come anticorpo policlonale, la coerenza lotto per lotto deve essere verificata.
• Condizioni di tampone acido possono aumentare l'interazione anticorpo-antigene per applicazioni come l'immunoistochimica o i saggi di attività enzimatica, dato che l'optimum di pH di CTSK è acido.

CamelBio: il tuo ponte di approvvigionamento one-stop

CamelBio offre a produttori di diagnostica, laboratori e istituti di ricerca una piattaforma di approvvigionamento completa per materie prime IVD, dalla validazione del concetto all'applicazione clinica. Per la ricerca sul metabolismo osseo e sulle proteasi, forniamo coppie di anticorpi validate, proteine ricombinanti e reagenti ausiliari all'ingrosso per accelerare lo sviluppo del vostro saggio CTSK. Sfruttate la nostra catena di approvvigionamento integrata e la nostra esperienza tecnica per ottenere materie prime per bersagli rari e semplificare il vostro flusso di lavoro diagnostico.