Anticorpo monoclonale anti-Catepsina L per WB, IHC-P, ELISA - P07711

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Catepsina L

• La pro-catepsina L (Catepsina L1/MEP) è una proteasi tiolica lisosomiale che svolge un ruolo centrale nella degradazione delle proteine, nell'elaborazione dell'antigene e nel rimodellamento osseo (probabile).
• L'inizio alternativo della traduzione produce isoforme nucleari che scindono il fattore di trascrizione CUX1, regolando la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:15099520
• Nella tiroide, solubilizza la tireoglobulina per il rilascio dell'ormone T4; nelle cellule neuroendocrine, processa la pro-encefalina in encefalina.
• La Catepsina L secreta genera l'endostatina dal collagene XVIII e, come elastasi, degrada la matrice extracellulare durante l'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:10716919
• Facilita l'ingresso di SARS-CoV, SARS-CoV-2 e altri virus attivando proteoliticamente le glicoproteine spike nei lisosomi. Riferimenti correlati: PMID:32142651, PMID:16339146, PMID:18562523
• A livello subcellulare, si trova nei lisosomi, nelle vescicole secretorie, nella membrana cellulare apicale, nello spazio extracellulare e nel nucleo; è attiva come enzima maturo dopo la rimozione proteolitica del propeptide.
• Appartiene alla famiglia delle proteasi cisteiniche della papaina (C1); è una glicoproteina con ponti disolfuro, sintetizzata come zimogeno e attivata dal pH basso o da altre proteasi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 100–200) si trova nella regione N-terminale della pro-catepsina L umana; l'epitopo può essere esposto sia nel proenzima sia nell'enzima maturo, ma gli utenti devono confermare la specificità per la forma desiderata.
• Per il Western blot, la banda principale è attesa a ~38 kDa (pro-catepsina L); in condizioni riducenti, può essere rilevata anche la catena pesante matura (~25 kDa). Ottimizzare le condizioni di caricamento e lisi per ridurre al minimo l'autolisi.
• Per l'IHC-P, utilizzare il recupero antigenico indotto dal calore (ad es., tampone citrato pH 6,0) e validare con tessuti positivi noti per esprimere la Catepsina L (ad es., fegato, placenta). Includere un controllo isotipico.
• Per l'ELISA, considerare l'abbinamento con un diverso anticorpo monoclonale o policlonale diretto contro il bersaglio per sviluppare un saggio a sandwich e validare linearità e recupero nella propria matrice.

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