Anticorpo policlonale anti-Catepsina L/V/K/H per WB, IF/ICC, ELISA - P07711

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Catepsina L

• La procatepsina L (Catepsina L1) è una proteasi cisteinica lisosomiale codificata dal gene CTSL, nota anche come proteina maggiormente secreta (MEP). L'inizio alternativo della traduzione produce isoforme con o senza peptide segnale, determinando la localizzazione nucleare o lisosomiale.
• Funziona come proteasi tiolica essenziale per la degradazione complessiva delle proteine nei lisosomi, la processazione degli antigeni, il rimodellamento osseo e il rilascio degli ormoni tiroidei attraverso la proteolisi della tireoglobulina.
• A livello extracellulare, agisce come principale enzima responsabile della degradazione dell'elastina a pH neutro e genera endostatina da COL18A1, contribuendo al rimodellamento della matrice extracellulare durante l'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:10716919
• Facilita l'ingresso nelle cellule ospiti dei coronavirus (SARS-CoV, SARS-CoV-2) e del virus Ebola attivando proteoliticamente le glicoproteine spike virali nei lisosomi attraverso una via lenta attivata dall'acidità. Riferimenti correlati: PMID:16339146 PMID:18562523 PMID:32142651 PMID:16081529 PMID:26953343
• Regola la progressione del ciclo cellulare attraverso la processazione proteolitica del fattore di trascrizione CUX1; le isoforme nucleari prive del peptide segnale scindono CUX1 modulando l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:15099520
• La localizzazione subcellulare comprende lisosomi, membrane cellulari apicali, vescicole secretorie (granuli cromaffini) e spazio extracellulare; inoltre, la proteina si trova nel nucleo quando viene tradotta da siti di inizio a valle.
• Viene modificata post-traduzionalmente mediante glicosilazione e formazione di ponti disolfuro; è sintetizzata come zimogeno inattivo, che viene processato proteoliticamente per generare l'enzima maturo attivo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde agli amminoacidi 114-333 della Catepsina L umana, una regione all'interno del dominio proteasico maturo, che può contribuire alla reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto della proforma è di circa 38 kDa; tuttavia, le forme mature processate possono apparire più piccole. Includere inibitori delle proteasi appropriati durante la preparazione dei campioni.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare le condizioni di permeabilizzazione per rilevare le frazioni lisosomiali o nucleari e validare la localizzazione con marcatori degli organelli.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo; utilizzare proteine ricombinanti o standard peptidici come controlli positivi.
• A causa dell'inizio alternativo della traduzione, possono essere presenti più isoforme; verificare i pattern delle bande nel proprio sistema cellulare o tissutale utilizzando controlli appropriati.

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