Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Catecatina L/V/K/H per WB, IHC-P, ELISA - P07711/O60911/P43235/P09668

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Catecatina L

• La Procatecatina L (Catecatina L1), nota anche come proteina escreta maggiore (MEP), è una proteasi cisteinica lisosomiale codificata dal gene CTSL. Appartiene alla famiglia delle peptidasi C1 e condivide un'alta omologia con le catecatine V, K e H.
• Come proteasi tiolica, la catecatina L è essenziale per il ricambio generale delle proteine all'interno dei lisosomi. Partecipa a processi diversi, incluso il processamento degli antigeni nelle cellule epiteliali timiche, il rimodellamento osseo e il rilascio proteolitico dell'ormone tiroideo tiroxina dalla tireoglobulina.
• La catecatina L degrada l'elastina a pH neutro e si accumula nello spazio extracellulare delle cellule che presentano l'antigene, contribuendo al rimodellamento della matrice extracellulare durante l'infiammazione. Genera anche l'inibitore dell'angiogenesi endostatina dal collagene XVIII. Riferimenti correlati: PMID:10716919
• Nelle cellule prive di TMPRSS2, la catecatina L facilita l'ingresso di SARS-CoV, SARS-CoV-2 e altri coronavirus clivando le glicoproteine spike all'interno dei lisosomi, consentendo la fusione della membrana. Riferimenti correlati: PMID:16339146
  PMID:18562523
  PMID:32142651
  PMID:16081529
  PMID:26953343
• L'inizio della traduzione alternativo produce isoforme prive del peptide segnale, che si localizzano nel nucleo e clivano il fattore di trascrizione CUX1, modulando così la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:15099520
• La catecatina L è principalmente localizzata ai lisosomi ma può essere trovata anche alla membrana cellulare apicale, nelle vescicole secretorie (es. granuli cromaffini), nello spazio extracellulare e nel nucleo in determinate condizioni.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro. L'enzima è sintetizzato come uno zimogeno inattivo (procatecatina L) e attivato per clivaggio proteolitico. La sua forma matura migra a circa 38 kDa su SDS-PAGE, mentre il precursore a lunghezza intera è di circa 37,6 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione conservata (aa 50–150) della catecatina L umana, che probabilmente spiega la reattività crociata con le catecatine V, K e H. Quando si interpretano i risultati, considerare la possibile rilevazione di più membri della famiglia.
• Per il western blotting, è prevista una banda vicino a 38 kDa in condizioni riducenti. Notare che la procatecatina L (~37,5 kDa) e le sue forme elaborate possono essere visibili a seconda della preparazione del campione e del contesto cellulare.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), potrebbero essere richiesti metodi di recupero dell'antigene per smascherare gli epitopi nei tessuti fissati in formalina. Si raccomanda l'ottimizzazione delle condizioni di recupero (es. tampone citrato vs EDTA, pH e riscaldamento).
• Per ELISA, questo anticorpo può essere adatto come reagente di cattura o di rilevamento. Validare nella matrice di campione appropriata (es. lisati cellulari, estratti tissutali o fluidi biologici) e confermare la specificità con controlli di proteine ricombinanti.
• Dato che è espresso in un'ampia gamma di tessuti e tipi cellulari, inclusi cellule immunitarie e epiteli, includere appropriati controlli positivi e negativi. Per gli studi sull'ingresso virale, notare che la catecatina L agisce in compartimenti acidi; possono essere usati inibitori come leupeptina o E-64 per confermare la specificità.

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