Anticorpo policlonale Anti-M6PR indipendente da cationi (IGF2R) per WB, IF/ICC, ELISA - P11717

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della M6PR indipendente da cationi (IGF2R)

• Il recettore mannosio-6-fosfato indipendente da cationi (CI-M6PR), noto anche come recettore del fattore di crescita insulino-simile 2 (IGF2R), CD222 o MPR300, è codificato dal gene IGF2R nell'uomo. Si tratta di un grande recettore transmembrana multifunzionale che svolge ruoli critici nel traffico degli enzimi lisosomiali e nella rimozione dei fattori di crescita.
• Media il trasporto degli enzimi lisosomiali fosforilati neo sintetizzati dal complesso di Golgi ai lisosomi. Si lega ai residui fosfomannosili presenti su questi enzimi, e il complesso recettore-ligando viene trasportato in un compartimento prelisosomiale acido dove avviene la dissociazione. Il recettore viene poi riciclato di nuovo nel Golgi tramite il complesso retromero. Riferimenti correlati: PMID:18817523 PMID:2963003
• Si lega al fattore di crescita insulino-simile 2 (IGF2) con elevata affinità, portando all'internalizzazione e alla degradazione lisosomiale di IGF2. Questa funzione regola negativamente la segnalazione IGF e limita la crescita fetale. La perdita di imprinting o le mutazioni in IGF2R sono state associate a cancro e disordini dello sviluppo. Riferimenti correlati: PMID:18046459
• Agisce come regolatore positivo della coattivazione dei linfociti T legandosi alla dipeptidil peptidasi 4 (DPP4/CD26) sulla superficie cellulare, creando un legame tra funzioni metaboliche e immunitarie. Riferimenti correlati: PMID:10900005
• Si localizza principalmente sulla membrana dell'apparato di Golgi e sulla membrana degli endosomi, dove cicla tra la rete trans-Golgiana, gli endosomi e la membrana plasmatica per catturare il carico sia a livello intracellulare che sulla superficie cellulare.
• Subisce diverse modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione, palmitoilazione e metilazione. Contiene legami disolfuro, è fortemente glicosilato e è ancorato alle membrane tramite una singola elica transmembrana. Queste caratteristiche sono fondamentali per la sua stabilità, il traffico e le funzioni di legame con il ligando.
• La proteina matura ha un peso molecolare apparente di circa 274 kDa, coerente con la massa prevista dalla sua sequenza amminoacidica. Il suo grande dominio extracellulare è composto da 15 unità ripetute, che sono coinvolte nel legame con mannosio-6-fosfato e IGF2.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 2327–2491, che si trova nella regione C-terminale del recettore. Questo progetto può favorire il riconoscimento della CI-M6PR (IGF2R) a lunghezza intera nella sua conformazione nativa.
• Dato l'elevato peso molecolare (~274 kDa), si consiglia di utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale (es. gel di separazione al 6%) e tempi di trasferimento prolungati o metodi di trasferimento a umido per garantire un'efficace blotting della proteina bersaglio.
• Questo anticorpo è policlonale di coniglio; può rilevare bande aggiuntive a causa del riconoscimento di più epitopi. Convalidare la specificità confrontando le intensità del segnale tra lisati di controllo e lisati di knockdown/knockout di IGF2R.
• Per l'immunofluorescenza, confermare che il pattern di colorazione si sovrapponga con marcatori stabiliti di Golgi/endosomi. Le condizioni di permeabilizzazione devono essere ottimizzate poiché l'epitopo è intracellulare.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante come controllo positivo per valutare l'attività di legame. Non estrapolare i limiti di rilevazione quantitativi solo dalle specifiche del prodotto; si raccomanda la titolazione empirica.

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