Anticorpo monoclonale coniglio anti-Cation-independent M6PR (IGF2R) per WB, IHC-P, ELISA - P11717

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del Cation-independent M6PR (IGF2R)

• Il Cation-independent M6PR (IGF2R), anche designato recettore del mannosio-6-fosfato da 300 kDa (MPR300) o recettore 2 del fattore di crescita insulino-simile, è una grande glicoproteina transmembrana codificata dal gene IGF2R.
• Media il trasporto degli enzimi lisosomiali fosforilati dal complesso di Golgi e dalla superficie cellulare verso i lisosomi. Gli enzimi lisosomiali che recano residui fosfomanosilici si legano specificamente al recettore e il complesso recettore-ligando viene internalizzato, dissociandosi nel compartimento pre-lisosomiale acido. Il recettore viene poi riciclato indietro al Golgi tramite il complesso retromer. Riferimenti correlati: PMID:18817523, PMID:2963003
• Oltre al suo ruolo di traffico dipendente da M6P, IGF2R si lega al fattore di crescita insulino-simile 2 (IGF2) con alta affinità, funzionando come recettore di clearance che regola i livelli extracellulari di IGF2. Riferimenti correlati: PMID:18046459
• IGF2R agisce come regolatore positivo della co-attivazione delle cellule T legando la dipeptidil peptidasi 4 (DPP4). Riferimenti correlati: PMID:10900005
• Il recettore cicla dinamicamente tra la membrana dell'apparato di Golgi e i compartimenti endosomiali, una localizzazione essenziale per le sue funzioni di smistamento e trasporto.
• IGF2R è estesamente modificato post-traduzionalmente, presentando glicosilazione, ponti disolfuro, acetilazione, metilazione, palmitoilazione e fosforilazione. La sua struttura include un peptide segnale, 15 ripetizioni extracitoplasmatiche, un'elica transmembrana singola e una breve coda citoplasmatica.
• La proteina matura ha un peso molecolare previsto di circa 274 kDa, coerente con la sua designazione come MPR300.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione C-terminale (aa 2140-2300), che potrebbe favorire il rilevamento dell'IGF2R a lunghezza intera. Considerare l'uso di lisati di tessuti o linee cellulari ricchi di lisosomi (es. fegato, placenta o fibroblasti) come controlli positivi per il Western blotting.
• A causa della grande dimensione proteica (274 kDa), utilizzare un gel di poliacrilamide a bassa percentuale (6–8%) e condizioni di trasferimento a umido prolungate (es. durante la notte a 4°C) su membrana PVDF. Includere marker ad alto peso molecolare pre-colorati per monitorare l'efficienza del trasferimento.
• Per IHC-P, eseguire un appropriato recupero dell'antigene e ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario. Includere controlli tissutali positivi e negativi per validare la specificità della colorazione sia nei campioni umani che in quelli di ratto.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare di standard di proteine ricombinanti per stabilire saggi quantitativi. Se i disegni sperimentali coinvolgono modelli roditori, validare la reattività crociata nei sistemi di ratto.
• Validare sempre l'anticorpo nel proprio contesto sperimentale specifico, poiché le prestazioni possono variare con la preparazione del campione e le condizioni del saggio.

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