Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CBFB per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13951

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del CBFB

• Codificata dal gene CBFB, la subunità beta del fattore di legame al core è una subunità del fattore di trascrizione che forma un complesso eterodimerico con le proteine della famiglia RUNX (RUNX1, RUNX2, RUNX3), noto come fattore di legame al core (CBF). CBFB aumenta allostericamente l'affinità di legame al DNA dei fattori di trascrizione RUNX.
• I complessi CBF si legano alla sequenza consenso core 5′-TGTGGT-3′ negli enhancer e nei promotori di vari geni, tra cui il virus della leucemia murina, l'enhancer del poliomavirus, gli enhancer del recettore delle cellule T, LCK, IL3 e GM-CSF, regolando così la trascrizione.
• Durante lo sviluppo delle cellule T citotossiche (CD8+), i complessi CBF agiscono come silenziatori trascrizionali legandosi alla sequenza di legame di RUNX all'interno del locus ZBTB7B e reprimendone l'espressione per consentire la differenziazione.
• CBFB è bersaglio della proteina Vif di HIV-1, che la recluta per formare un complesso ligasi E3 dell'ubiquitina Cullin-5-RING (complesso ECS) che catalizza l'ubiquitinazione e la degradazione di APOBEC3F e APOBEC3G (PubMed:22190037, PubMed:31792451, PubMed:36598981). Il complesso può anche ubiquitinare in una certa misura APOBEC3H (PubMed:37640699). L'associazione con Vif inibisce inoltre l'attività di coattivatore di CBFB (PubMed:22190037). Riferimenti correlati: PMID:22190037 PMID:31792451 PMID:36598981 PMID:37640699
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare, in linea con il suo ruolo nella regolazione trascrizionale.
• Le parole chiave di UniProt evidenziano il suo coinvolgimento nello splicing alternativo, nei riarrangiamenti cromosomici (ad es., inv(16) nella leucemia mieloide acuta), nel potenziale proto-oncogenico e nelle associazioni con malattie, tra cui il nanismo. È inoltre una fosfoproteina.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che comprende gli amminoacidi 1-182 del CBFB umano. Questa porzione N-terminale contiene il dominio conservato necessario per l'interazione con RUNX ed è identica o altamente simile nel topo e nel ratto, supportando la reattività crociata osservata.
• Per il western blot (WB), è prevista una banda intorno a 22 kDa. Si consiglia di utilizzare estratti nucleari e controlli di caricamento appropriati.
• L'immunofluorescenza (IF/ICC) e l'immunoistochimica (IHC-P) dovrebbero rivelare una localizzazione nucleare. Validare in linee cellulari o tessuti noti per esprimere CBFB.
• L'ELISA può essere utilizzato per l'analisi quantitativa; le condizioni ottimali di rivestimento e le concentrazioni dell'anticorpo devono essere determinate empiricamente.
• Come per qualsiasi anticorpo, validare nel contesto sperimentale specifico e considerare controlli di pre-adsorbimento, se necessario.

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