Anticorpo policlonale rabbit anti-CBLB per WB, ELISA - Q13191

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CBLB

• CBLB (Casitas B-lineage lymphoma proto-oncogene b) codifica per una E3 ubiquitina-proteina ligasi che accetta l'ubiquitina dagli enzimi E2 e la trasferisce alle proteine substrato, generalmente indirizzandole alla degradazione proteasomiale. Riferimenti correlati: PMID:20525694, PMID:40101708
• È un regolatore negativo critico delle vie di trasduzione del segnale del recettore delle cellule T (TCR), del recettore delle cellule B (BCR) e del recettore ad alta affinità per l'immunoglobulina epsilon (FCER1), contribuendo alla tolleranza immunitaria e all'anergia. Riferimenti correlati: PMID:40101708
• Nelle cellule T naive, CBLB inibisce l'attivazione di VAV1 dopo l'engagement del TCR, imponendo la necessità della costimolazione di CD28 per la proliferazione e la produzione di IL-2 (per similarità). Ubiquitina anche PIK3R1/p85, compromettendone il reclutamento al TCR e l'attivazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:11087752, PMID:11526404
• Nelle cellule T attivate, CBLB inibisce l'attivazione di PLCG1 e la mobilizzazione del calcio dopo una nuova stimolazione, promuovendo l'anergia delle cellule T (per similarità). È anche coinvolto nell'inibizione della segnalazione del TCR mediata da LAG3 catalizzando l'ubiquitinazione di LAG3 legata al Lis-63. Riferimenti correlati: PMID:39030301, PMID:40101708
• CBLB si localizza prevalentemente nel citoplasma. È espresso nella placenta, cuore, polmone, rene, milza, ovaio, testicolo, cervello fetale, fegato e linee cellulari ematopoietiche, ma non nel cervello adulto, fegato, pancreas, ghiandola salivare o muscolo scheletrico. È presente a livello proteico nei linfociti.
• L'impianto alternativo produce più isoforme e la proteina è soggetta a fosforilazione e legame con ioni metallici. Contiene domini a dito di zinco, un dito RING ed è classificata come transferasi nella via di coniugazione dell'ubiquitina.
• Promuove leggermente l'ubiquitinazione di SRC e può essere coinvolto nell'ubiquitinazione e nell'internalizzazione di EGFR. Riferimenti correlati: PMID:14661060, PMID:10086340

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 883–982 di CBLB umano (isoforma NP_001308717.1), una regione vicino all'estremità C-terminale. Data la localizzazione citoplasmatica del bersaglio, si consiglia di utilizzare buffer di lisi appropriati e convalidare la rilevazione nei lisati di cellule intere.
• Per Western blot (WB), il peso molecolare previsto di CBLB è di circa 109 kDa; si raccomanda l'inclusione di un marcatore di peso molecolare precolorato. Poiché la reattività crociata è riportata per uomo, topo e ratto, si prevede una banda di dimensioni simili in tutte queste specie, ma è sempre necessario convalidare con controlli positivi e negativi.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale di questo anticorpo può catturare più epitopi, aumentando la sensibilità; tuttavia, si consiglia la titolazione e l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e rilevazione.

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