Anticorpo policlonale rabbit anti-CBR1 per WB, ELISA - P16152

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Carbonil reduttasi [NADPH] 1

• La Carbonil reduttasi [NADPH] 1 (CBR1), indicata anche come 15-idrossiprostaglandina deidrogenasi, 20-beta-idrossisteroide deidrogenasi, PG-9-KR o SDR21C1, è un membro della famiglia delle deidrogenasi/reduttasi a catena corta. Il gene (CBR1, CRN, SDR21C1) genera più isoforme tramite splicing alternativo.
• CBR1 è una ossidoreduttasi citosolica dipendente da NADPH con ampia specificità per il substrato: riduce numerosi composti carbonilici endogeni ed esogeni, tra cui chinoni, menadione e prostaglandine. Può convertire la prostaglandina E in prostaglandina F2-alfa.
• L'enzima svolge un ruolo chiave nel metabolismo dei farmaci, riducendo le antracicline antitumorali doxorubicina e daunorubicina nei loro metaboliti alcolici cardiotossici doxorubicinaolo e daunorubicinaolo, un processo critico nella cardiotossicità indotta da chemioterapia. Riferimenti correlati: PMID:15799708, PMID:17344335, PMID:17912391
• CBR1 può legare il glutatione e ridurre la S-nitrosoglutatione, partecipando così alla segnalazione cellulare dell'ossido nitrico e all'omeostasi redox. Riferimenti correlati: PMID:17344335, PMID:18826943
• Nel tessuto adiposo, CBR1 metabolizza i glucocorticoidi catalizzando la riduzione dipendente da NADPH del cortisolo/corticosterone in 20beta-diidrocortisolo (20b-DHF) o 20beta-corticosterone (20b-DHB), che sono deboli agonisti del recettore dei glucocorticoidi (NR3C1) e del recettore dei mineralocorticoidi (NR3C2). Riferimenti correlati: PMID:28878267
• Subcellularmente, CBR1 è localizzata nel citoplasma, in coerenza con il suo ruolo nel metabolismo dei farmaci di fase I e nel metabolismo lipidico.
• A livello proteico, CBR1 è espressa nel rene, come rilevato dalla proteomica basata su spettrometria di massa.
• La proteina CBR1 subisce modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, che possono regolarne l'attività e la stabilità.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo policlonale è stato prodotto utilizzando una proteina di fusione ricombinante che comprende la CBR1 umana full-length (residui 1–277), il che può consentire il riconoscimento sia delle forme native che denaturate. Tenere conto di questo aspetto nella scelta dei protocolli specifici per l'applicazione.
• Nel Western blot, è attesa una banda che migra vicino a 30 kDa in lisati di tessuto umano o di topo. Eseguire la validazione utilizzando controlli positivi noti come il lisato di rene, dove l'espressione della proteina CBR1 è confermata.
• Per ELISA, l'accoppiamento con un anticorpo di cattura/detezione corrispondente o l'utilizzo dello stesso policlonale in un formato di saggio diretto può fornire un segnale ottimale; includere pozzetti appropriati per il bianco e il controllo negativo.
• Sebbene sia stata osservata reattività crociata con il topo, è necessario valutare l'omologia di sequenza tra le altre specie di interesse; convalidare sempre nella matrice di campione prevista per confermare la specificità e l'assenza di legaggio off-target.

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