Anticorpo policlonale di coniglio anti-CCK per WB ed ELISA - P06307

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della colecistochinina

• La colecistochinina (CCK) è un ormone peptidico che svolge un ruolo chiave nella fisiologia gastrointestinale inducendo la contrazione della cistifellea e la secrezione degli enzimi pancreatici.
• La CCK trasmette il segnale attraverso due sottotipi recettoriali: i recettori CCK-A (principalmente nel pancreas) stimolano il rilascio di amilasi, mentre i recettori CCK-B (soprattutto nello stomaco) mediano la secrezione di acido gastrico.
• La proteina viene sintetizzata come precursore e subisce un processamento proteolitico in corrispondenza di residui basici appaiati, producendo l'ormone biologicamente attivo.
• La CCK è una proteina secreta presente nel liquido cerebrospinale e nelle urine; la sua funzione nel cervello è ancora oggetto di studio.
• Le modifiche post-traduzionali includono la solfatazione dei residui di tirosina, l'amidazione C-terminale e la glicosilazione, processi fondamentali per la sua attività biologica.
• Il peso molecolare previsto del peptide maturo è di circa 12,7 kDa (UniProt) e, nelle condizioni sperimentali, l'anticorpo rileva una banda intorno ai 13 kDa.
• La CCK fa parte del proteoma di riferimento e presenta una struttura 3D risolta, a supporto della sua caratterizzazione strutturale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 21–115 del precursore CCK a lunghezza intera, comprendendo la maggior parte dell'ormone maturo; questo design può consentire il rilevamento sia del precursore sia delle forme processate.
• Per il Western blotting, considerare il basso peso molecolare (~13 kDa) e ottimizzare la concentrazione del gel (ad es. SDS-PAGE al 15%) e le condizioni di trasferimento (ad es. membrana con limite di ritenzione per molecole a basso peso molecolare, pori da 0,2 µm) per trattenere il peptide.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo policlonale può fornire un legame multi-epitopico, migliorando potenzialmente la sensibilità; tuttavia, includere sempre controlli positivi e negativi appropriati.
• Poiché la CCK è un peptide secreto, la preparazione dei campioni da tessuti o lisati cellulari può richiedere una manipolazione accurata per prevenire la degradazione; considerare l'uso di inibitori delle proteasi e di apparecchiature refrigerate.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto suggerisce l'utilità nei modelli di roditori, ma si raccomanda la validazione specie-specifica nei propri saggi.

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