Anticorpo policlonale coniglio anti-CCT3 per WB, IF/ICC, ELISA - P49368

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della subunità gamma della proteina T-complessa

• CCT3 è una subunità del T-complesso contenente chaperonina (TRiC), che favorisce il ripiegamento dipendente da ATP di proteine citoscheletriche come l'actina e la tubulina. Riferimenti correlati: PMID:25467444, PMID:36493755, PMID:35449234
• Il complesso TRiC, che include CCT3, media il ripiegamento di WRAP53/TCAB1, una proteina essenziale per il mantenimento dei telomeri. Riferimenti correlati: PMID:25467444
• Il TRiC contenente CCT3 è coinvolto nell'assemblaggio del BBSoma, un complesso che regola il traffico di vescicole verso le ciglia, svolgendo quindi un ruolo nella ciliogenesi. Riferimenti correlati: PMID:20080638
• CCT3 appartiene alla famiglia CCT (chaperonin containing TCP1), composta da otto subunità diverse (CCT1–8) che formano il complesso a doppio anello TRiC.
• CCT3 è localizzata prevalentemente nel citoplasma, in linea con il suo ruolo di chaperone molecolare.
• La proteina subisce acetilazione e fosforilazione, come indicato nella sua annotazione, e presenta domini di legame per ATP e nucleotidi essenziali per la sua funzione di chaperonina.
• Il peso molecolare teorico di CCT3 è di circa 60,5 kDa (UniProt P49368), che corrisponde alla banda osservata a 61 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-300) della CCT3 umana. Tenere in considerazione questo aspetto quando si valuta la rilevazione di isoforme full-length rispetto a potenziali isoforme troncate.
• Per il western blotting, attendersi una banda a circa 61 kDa. Validare l'anticorpo con controlli positivi appropriati (ad esempio lisati di HeLa, HEK293 o tessuti) e utilizzare un protocollo standard di SDS-PAGE e trasferimento.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ottimizzare la fissazione (ad esempio PFA al 4%) e la permeabilizzazione (ad esempio Triton X-100 allo 0,1%) per garantire l'accessibilità all'antigene CCT3 citoplasmatico. Includere controlli negativi appropriati.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione. Titolare l'anticorpo e confermare la specificità utilizzando CCT3 ricombinante o lisati cellulari.

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