Anticorpo policlonale Anti-CCT4 per WB, IF/ICC, ELISA - P50991

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CCT4

• CCT4 codifica la subunità delta del complesso ad anello della proteina del complesso T (TCP-1) (TRiC), una chaperonina citosolica che media il ripiegamento dipendente da ATP di circa il 10% del proteoma, in particolare actina e tubulina. Riferimenti correlati: PMID:25467444, PMID:36493755, PMID:35449234
• TRiC ripiega anche la proteina 1 del corpo di Cajal della telomerasi (WRAP53/TCAB1), collegando la funzione di CCT4 al mantenimento dei telomeri. Riferimenti correlati: PMID:25467444
• La chaperonina contribuisce alla ciliogenesi aiutando l'assemblaggio del BBSoma, un complesso fondamentale per il traffico vescicolare verso le ciglia. Riferimenti correlati: PMID:20080638
• CCT4 si localizza prevalentemente nel citoplasma ed è concentrato nei centrosomi e nei corpi basali delle ciglia, coerentemente con il suo ruolo nel ripiegamento delle proteine citoscheletriche e nel trasporto ciliare.
• La proteina è soggetta a molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione e fosforilazione, che possono regolare l'attività della chaperonina.
• L'impianto alternativo produce più varianti di trascritto, suggerendo una diversificazione funzionale.
• Come subunità di TRiC, CCT4 fa parte di un grande complesso eterooligomerico composto da otto diverse subunità disposte in una struttura a doppio anello.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi da 130 a 390 di CCT4 umano; si prevede che il legame agli epitopi all'interno di questa regione sia specifico, ma la reattività crociata con altre subunità TCP-1 deve essere esclusa a causa dell'omologia di sequenza all'interno della famiglia.
• Per Western blot, si suggerisce una diluizione iniziale 1:1000 per lisati di uomo, topo e ratto; è prevista una banda vicino a 58 kDa. Includere controlli positivi e negativi rilevanti.
• Nell'immunofluorescenza, CCT4 mostra colorazione citoplasmatica con arricchimento nei centrosomi e nei corpi basali ciliari; la pre-estrazione con detergente può migliorare il segnale dei microtubuli e dei corpi basali.
• Per applicazioni ELISA, utilizzare la proteina ricombinante o lisati cellulari come antigene di rivestimento; la variabilità lotto per lotto inerente agli anticorpi policlonali deve essere valutata per la consistenza quantitativa.
• Data la reattività dell'anticorpo tra uomo, topo e ratto, è adatto per studi traslazionali in queste specie.

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