Anticorpo policlonale coniglio anti-CD117 per WB, ELISA - P05532

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CD117

• Il CD117, noto anche come c-Kit o recettore del fattore di crescita delle cellule mastocitarie/staminali Kit, è una recettore tirosin chinasi codificato dal proto-oncogene Kit (SWISS: P05532). Appartiene alla famiglia dei recettori tirosin chinasi di tipo III, caratterizzata da domini immunoglobulinici extracellulari e un dominio chinasico intracellulare.
• Al legame con il suo ligando KITLG/SCF, il CD117 dimerizza e autofosforila, innescando vie di segnalazione a valle tra cui PI3K-AKT, RAS-MAPK/ERK e JAK-STAT. Queste cascate regolano la sopravvivenza cellulare, la proliferazione, l'ematopoiesi, il mantenimento delle cellule staminali, la gametogenesi, la melanogenesi e lo sviluppo delle cellule mastocitarie.
• Esistono molteplici isoforme dovute allo splicing alternativo. L'isoforma 1 e l'isoforma 2 si trovano nel midollo osseo e nelle spermatogonie; l'isoforma 3 è arricchita nelle cellule staminali ematopoietiche e rilevata negli stadi successivi della spermatogenesi.
• A livello subcellulare, il CD117 si localizza principalmente alla membrana cellulare, ma può anche essere internalizzato e rilevato nel citoplasma dopo l'attivazione o durante il turnover del recettore.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di ponti disolfuro, ubiquitinazione e una vasta fosforilazione sui residui di tirosina. Queste modifiche modulano l'attività del recettore, la stabilità e l'output di segnalazione.
• Il CD117 è ampiamente espresso nelle cellule staminali ematopoietiche, nelle cellule mastocitarie, nei melanociti, nelle cellule germinali e nelle cellule interstiziali di Cajal. Mutazioni o un'espressione aberrante sono associate a varie patologie, tra cui mastocitosi, tumori stromali gastrointestinali e leucemie.
• Parole chiave associate al CD117: Splicing alternativo, Legame ATP, Membrana cellulare, Citoplasma, Variante di malattia, Ponte disolfuro, Glicoproteina, Dominio immunoglobulinico, Chinasi, Magnesio, Membrana, Legame metallico, Legame nucleotidico, Fosfoproteina, Proto-oncogene, Recettore, Proteoma di riferimento, Ripetizione, Segnale, Transferasi, Transmembrana, Elica transmembrana, Tirosina-proteina chinasi, Coniugazione Ubl.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo policlonale è stato generato utilizzando un immunogeno ricombinante che copre gli amminoacidi 25–523 del CD117 murino, corrispondente al dominio extracellulare. È probabile che riconosca le forme native e denaturate del recettore.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto del CD117 è di circa 109 kDa. A causa della glicosilazione, la banda osservata potrebbe apparire leggermente più alta o come una banda diffusa. Eseguire marcatori proteici adeguati e convalidare la banda specifica utilizzando controlli appropriati.
• Nelle applicazioni ELISA, considerare formati indiretti o a sandwich. La natura policlonale può fornire un'elevata sensibilità, ma confermare la specificità testando su lisati CD117-negativi o campioni knockout se disponibili.
• L'anticorpo cross-reagisce con il CD117 murino. Per studi su campioni umani o altre specie, verificare l'omologia di sequenza ed eseguire esperimenti pilota per valutare la reattività crociata.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare. Si consiglia di qualificare ogni nuovo lotto nel proprio sistema di saggio specifico e ottimizzare le diluizioni di lavoro.

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