Anticorpo monoclonale anti-CD117/c-Kit per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10721

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD117/c-Kit

• Il recettore del fattore di crescita delle cellule mastocitarie/staminali Kit (noto anche come SCFR, c-Kit, CD117, PBT) è una tirosina-chinasi proteica codificata dal gene KIT, un proto-oncogene con multiple isoforme.
• Funziona come recettore di superficie cellulare per il fattore di crescita delle cellule staminali (KITLG/SCF) e regola la sopravvivenza cellulare, la proliferazione, l'ematopoiesi, il mantenimento delle cellule staminali, la gametogenesi, lo sviluppo e la migrazione delle cellule mastocitarie e la melanogenesi.
• Dopo il legame del ligando, KIT autofosforila e attiva cascate di segnalazione a valle tra cui le vie PI3K/AKT1, RAS/RAF/MAPK, PLCγ/PKC e JAK/STAT.
• Si localizza sulla membrana cellulare ma può essere trovato anche nel citoplasma e subisce internalizzazione e degradazione indotte dal ligando.
• Nel testicolo, è rilevato nelle spermatogonie dello strato basale e nelle cellule interstiziali di Leydig, ma non nelle cellule di Sertoli o nelle spermatociti all'interno dei tubuli seminiferi. L'espressione viene mantenuta negli spermatozoi eiaculati. Riferimenti correlati: PMID:20601678
• Le caratteristiche strutturali chiave includono domini simili a immunoglobuline, un'elica transmembrana, un dominio chinasi intracellulare e siti per glicosilazione e formazione formazione di ponti disolfuro.
• Implicato in vari tumori e disturbi; le mutazioni sono associate alla piebaldism, ai tumori stromali gastrointestinali e alla mastocitosi.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 871–976 del CD117/c-Kit umano. L'epitopo si trova all'interno della regione C-terminale intracellulare, che può essere accessibile in condizioni denaturanti (WB) o dopo un'adeguata fissazione/permeabilizzazione per ICC e IHC.
• Per il Western blot, prevedere una banda a circa 110 kDa. Utilizzare un tampone di campione SDS-PAGE riducente e convalidare il rilevamento con una linea cellulare nota CD117-positiva (es. HMC-1, K562).
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'immunoistochimica (IHC‑P), potrebbe essere richiesto il recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore in tampone citrato pH 6,0) e il blocco dell'attività perossidasi endogena. Ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo primario e le condizioni di incubazione.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevamento. Si consiglia l'abbinamento con un ligando validato o un set di anticorpi; confermare la specificità con la proteina ricombinante CD117.

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