Anticorpo policlonale anti-CD117/c-Kit per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P10721

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit, noto anche come recettore Kit del fattore di crescita dei mastociti/delle cellule staminali, è una tirosin-chinasi recettoriale codificata dal proto-oncogene KIT. È una glicoproteina transmembrana a singolo passaggio appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline.
• Al legame con il suo ligando, il fattore delle cellule staminali (KITLG/SCF), Kit dimerizza e attiva molteplici cascate di segnalazione a valle, tra cui le vie PI3K-AKT, RAS-MAPK e JAK-STAT, regolando la sopravvivenza, la proliferazione e la differenziazione cellulare.
• Kit svolge ruoli critici nell'emopoiesi, nel mantenimento delle cellule staminali, nella gametogenesi, nella melanogenesi e nello sviluppo e nella funzione dei mastociti.
• Kit attivato fosforila numerosi substrati, tra cui PIK3R1, PLCG1, SH2B2, CBL e i fattori di trascrizione STAT, determinando diverse risposte cellulari.
• Il recettore è localizzato principalmente sulla membrana cellulare, ma può essere presente anche nel citoplasma.
• Nel testicolo, Kit è espresso negli spermatogoni, nelle cellule interstiziali di Leydig e negli spermatozoi eiaculati, ma non nelle cellule di Sertoli o negli spermatociti (PubMed:20601678). Riferimenti correlati: PMID:20601678
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione, ubiquitinazione e glicosilazione, che regolano l'attività e la stabilità del recettore.
• Le mutazioni di KIT sono associate a piebaldismo, mastocitosi, tumori stromali gastrointestinali e altre neoplasie maligne, evidenziandone il ruolo nell'oncogenesi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che comprende gli amminoacidi 210-412 di CD117/c-Kit umano. Questa regione fa parte del dominio extracellulare e può essere adatta al riconoscimento delle forme native del recettore nel Western blot e nell'immunofluorescenza.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto di Kit non glicosilato è di circa 110 kDa, ma la glicoproteina matura migra spesso a pesi molecolari superiori (circa 145 kDa) in condizioni riducenti. Validare nel proprio campione.
• Questo anticorpo policlonale riconosce Kit umano, murino e di ratto. Se necessario, considerare test di reattività crociata per altre specie.
• Kit è espresso nella membrana e nel citoplasma; pertanto, per rilevare le frazioni intracellulari mediante immunofluorescenza o immunoistochimica è necessaria la permeabilizzazione.
• Per la IHC-P, considerare il recupero antigenico e ottimizzare la diluizione e le condizioni di rilevazione in base al tipo di tessuto e al protocollo di fissazione.
• L'anticorpo può essere utilizzato per studiare la segnalazione di Kit nelle cellule staminali, nel melanoma, nei mastociti o nei tumori stromali gastrointestinali. Validare nei sistemi modello pertinenti.

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