Anticorpo policlonale di coniglio anti-CD11b (ITGAM) per WB, IHC-P, ELISA - P05555

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD11b

• L'integrina alfa-M (CD11b), codificata dal gene Itgam, è un membro della famiglia delle catene alfa delle integrine e si combina con la subunità beta-2 (ITGB2/CD18) per formare il recettore del complemento CR3 (Mac-1). Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.
• L'integrina ITGAM/ITGB2 media le interazioni adesive di monociti, macrofagi e granulociti, incluso il legame al frammento iC3b del complemento C3 e la facilitazione dell'uptake di particelle e patogeni rivestiti dal complemento (per omologia).
• Oltre al complemento, CD11b funge da recettore per il fibrinogeno, il fattore X e ICAM1; riconosce i motivi RGD e i peptidi P1/P2 della catena gamma del fibrinogeno, promuovendo così l'adesione e la migrazione dei leucociti.
• Il recettore svolge un ruolo centrale nella migrazione dei neutrofili e, insieme a CD18, è necessario per l'attivazione dei neutrofili preattivati da TNF mediata da CD177-PRTN3 (per omologia).
• Può regolare l'apoptosi indotta dalla fagocitosi nei neutrofili extravasati, contribuendo alla risoluzione dell'infiammazione (per omologia).
• Nel cervello, CD11b è necessaria, insieme a TYROBP/DAP12 nella microglia, per la produzione di ioni superossido che promuovono l'apoptosi neuronale durante lo sviluppo. Riferimenti correlati: PMID:18685038
• A livello subcellulare, CD11b è localizzata nella membrana cellulare ed è arricchita nelle zattere di membrana.
• L'espressione tessuto-specifica è osservata prevalentemente nei monociti, nei granulociti, in un sottogruppo di mastociti peritoneali e nella microglia.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 143–337 di CD11b murina e comprende una porzione della regione extracellulare N-terminale. Questo design può consentire il riconoscimento sia delle conformazioni native sia di quelle denaturate della proteina, rendendolo adatto per Western blot, immunoistochimica ed ELISA.
• Per l'analisi mediante Western blot, CD11b migra a circa 127 kDa. Si consiglia di utilizzare un gel SDS-PAGE al 6–12% e controlli positivi appropriati (ad esempio lisati di macrofagi o granulociti) per verificare la specificità.
• A causa della struttura prevista, caratterizzata da glicosilazione e ponti disolfuro, le condizioni riducenti e una preparazione ottimizzata dei campioni possono influenzare il rilevamento. Validare l'anticorpo nel sistema campione pertinente per confermarne le prestazioni.
• È stato riportato che questo anticorpo reagisce anche con CD11b umano e di ratto; tuttavia, le differenze di sequenza possono influenzare l'affinità in queste specie, pertanto si raccomanda una validazione indipendente nella specie bersaglio.
• Per le applicazioni IHC-P, i protocolli di recupero antigenico e i metodi di fissazione dei tessuti devono essere ottimizzati in base al tipo specifico di campione per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o il rilevamento di CD11b; si consiglia di abbinarlo a un anticorpo monoclonale compatibile in un formato ELISA a sandwich per aumentare la sensibilità.

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